miR-106b, miR-93靶向調(diào)控PTEN通過PI3K-Akt通路在乳腺癌進(jìn)展中的研究.pdf

1、目的：通過比較miR-106b，miR-93在乳腺癌不同轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞株中（MCF-7，MDA-M B-231）的表達(dá)差異，闡明miRN As在乳腺癌進(jìn)展中的功能機(jī)制，為乳腺癌的早期診斷及治療提供新的指導(dǎo)方向。
　　方法：
　　（1）通過qRT-PCR技術(shù)檢測乳腺癌組織及細(xì)胞中miR-106b，miR-93的相對表達(dá)情況。
　?。?）通過基因預(yù)測軟件(TargetScan Human7.1 and microRNA.or

2、g)預(yù)測miR-106b，miR-93的靶基因并采用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)在乳腺癌細(xì)胞中確證miRN As與靶向分子的調(diào)節(jié)關(guān)系。
　?。?）特異性上調(diào)MCF-7（人類乳腺癌低轉(zhuǎn)移株）中miR-106b，miR-93，下調(diào)MDA-M B-231（人類乳腺癌高轉(zhuǎn)移株）中miR-106b，miR-93，檢測上調(diào)及下調(diào)前后MCF-7，MDA-MB-231細(xì)胞中P TEN的變化及對功能實(shí)驗(yàn)的影響。
　　（4）采用逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)PTEN對上

3、調(diào)miR-106b，miR-93的MCF-7細(xì)胞中 P I3K/Ak t通路及功能試驗(yàn)的影響,同時(shí)檢測下調(diào) P TEN對干擾miR-106b，miR-93的MDA-MB-231細(xì)胞中PI3K/Akt通路及功能試驗(yàn)的影響。
　?。?）特異性下調(diào)MDA-MB-231細(xì)胞中的Ak t蛋白水平,檢測細(xì)胞功能試驗(yàn)的變化。
　　結(jié)果：
　?。?）miR-106b，miR-93在乳腺癌組織及細(xì)胞中高表達(dá)。
　　（2）靶基因預(yù)測

4、軟件預(yù)測PTEN為miR-106b，miR-93的共同靶基因，雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)了此結(jié)果。
　?。?）特異性上調(diào)MCF-7細(xì)胞中miR-106b，miR-93，PTEN的表達(dá)量顯著下降且細(xì)胞的遷移、侵襲、增殖能力明顯增強(qiáng)。干擾 MDA-MB-231細(xì)胞中的miR-106b，miR-93，PTEN的表達(dá)顯著增強(qiáng)且細(xì)胞的遷移、侵襲、增殖能力下降。
　?。?）上調(diào) PTEN逆轉(zhuǎn)了 MCF-7細(xì)胞中高表達(dá)的miR-106b，miR-

5、93對PI3K/Akt通路及功能實(shí)驗(yàn)的作用。干擾PTEN的表達(dá)逆轉(zhuǎn)了在MDA-MB-231細(xì)胞中抑制miR-106b，miR-93所產(chǎn)生的影響。
　?。?）特異性下調(diào)MDA-M B-231細(xì)胞中Akt蛋白水平，細(xì)胞的遷移、侵襲及增殖能力明顯下降。
　　結(jié)論：
　?。?）miR-106b，miR-93在癌和癌旁，MCF-7和MDA-MB-231中的表達(dá)均具有顯著性差異，這種差異與乳腺癌的生物學(xué)行為具有相關(guān)性。