26-nor-8-羥基-α-芒柄花醇對(duì)成骨細(xì)胞活性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、玉柏石松為石松科石松屬植物，在我國(guó)的一些民族醫(yī)藥中作伸筋草入藥，具有治療骨折和跌打損傷的作用?，F(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)研究也證實(shí)其具有一定的促進(jìn)成骨作用。但是，其有效成分是什么，這些有效成分通過(guò)什么途徑起作用，目前尚不清楚。因此，本研究擬以玉柏石松中分離出的一種新型化合物四環(huán)三萜26-nor-8-羥基-α-芒柄花醇（26-nor-8-hydroxy-α-onocerin，簡(jiǎn)稱(chēng)26HO）為對(duì)象，研究其對(duì)體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞分裂增殖和成骨相關(guān)基因表達(dá)的影

2、響，以期闡明其是否為治療骨折的有效成分及其治療骨損傷的分子機(jī)制。
　　 本文研究了26HO對(duì)體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞的細(xì)胞增殖、堿性磷酸酶的活性、及成骨相關(guān)基因(堿性磷酸酶ALP、骨涎蛋白BSP、I 型膠原Col I、骨鈣蛋白OC、骨粘連蛋白ON、骨橋蛋白OP、轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子Runx2和Osterix)表達(dá)的影響。
　　 用組織塊改良法分離小鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞。分離培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)正常，表現(xiàn)出較強(qiáng)的活性，經(jīng)鑒定為成骨細(xì)胞。
　

3、　 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：較高濃度（20μM/L，40μM/L）26HO短期（1天）處理可以促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖。長(zhǎng)期（3天）處理對(duì)成骨細(xì)胞增殖沒(méi)有顯著影響。
　　 研究表明，26HO 處理可以影響原代成骨細(xì)胞的堿性磷酸酶活性。
　　 總體來(lái)講，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)（從3天至14天），低濃度的26HO（5μM/L）由促進(jìn)成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性逐步變?yōu)橐种谱饔茫桓邼舛?20-40μM/L)26HO 則由抑制成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性