蠶蛹腸內營養(yǎng)制劑支持特性的實驗研究.pdf

1、腸內營養(yǎng)支持是醫(yī)院病人術前術后營養(yǎng)支持的重要組成部分，是供給病人特殊營養(yǎng)需求、促進病人康復的重要手段之一。術后早期腸內營養(yǎng)支持主要目的是減輕營養(yǎng)底物不足、防止細胞代謝紊亂、支持器官和組織的結構與功能、參與機體調控免疫與生理功能、減少器官功能障礙的發(fā)生。術后后期腸內營養(yǎng)支持進一步加速組織的修復和促進病人的康復。近年來開始強調特異性營養(yǎng)物質及其營養(yǎng)效率，常添加特殊營養(yǎng)物質與腸內營養(yǎng)聯(lián)合應用。禽流感和口蹄疫等禽畜類傳染病頻發(fā)帶來的禽畜傳統(tǒng)食品

2、原料的安全隱患，植物食品原料的氨基酸效價不高和功能成分有限的不足，開發(fā)動物性和植物性EN制劑受到限制。利用有效安全的新型蛋白資源開發(fā)腸內營養(yǎng)制劑是術前術后營養(yǎng)食品的重要研究方向之一。
　　蠶蛹作為昆蟲蛋白資源，具有安全、高效、綠色、益生等特點，是膳食補充劑或食品添加劑或腸內營養(yǎng)制劑的優(yōu)良原料，蠶蛹蛋白的相關高蛋白食品也日益受到人們的歡迎。但目前國外基本上沒有專門從蠶蛹蛋白綜合利用角度進行的研究報道，我國也主要停留在蛋白的完全水解生

3、產氨基酸層面。
　　本文研究中選用的蠶蛹寡肽樣品（SPPS1，SPPS2）是褐色、略有土腥味、易吸潮的均勻粉末，易溶于水，分子量測定結果表明由3-7個氨基酸殘基構成。蠶蛹蛋白樣品（SPPS3）是灰白色、無味的均勻粉末，微溶于水，分子量測定結果表明由76-153個氨基酸殘基構成?；诓钍緬呙枇繜岱ǎ―SC）測定的熱穩(wěn)定性曲線計算 SPPS1、SPPS2、SPPS3的變性溫度分別為119.11℃、111.04℃、106.77℃。基于氨

4、基酸分析儀測定SPPS1、SPPS2、SPPS3的氨基酸組成，含有18種氨基酸，谷氨酸（含谷氨酰胺）含量豐富，必需氨基酸占總氨基酸的比例分別是42.45％、45.18%和45.00%，必需氨基酸與非必需氨基酸質量之比分別為0.82、0.74和0.82。氨基酸評分(AAS)、化學評分(CS)的計算結果表明蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白中的蛋氨酸含量很顯著的高于標準模式含量，而且必需氨基酸的組成合理，符合并優(yōu)于FAO/WHO模式。SPPS1、SPPS2

5、、SPPS3三種樣品的必需氨基酸指數(shù)（EAAI）均大于0.90。
　　本研究分析了蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白在模擬胃腸道消化過程中的消化特性和氮釋放量。在胃蛋白酶消化階段，SPPS1和SPPS2的必需氨基酸總數(shù)為400左右，顯著高于SPPS3的必需氨基酸數(shù)量50左右，而進入胰蛋白酶消化階段時，三者的必需氨基酸總數(shù)接近，均達到400以上，蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白在體外模擬胃腸道消化試驗中有超過90%的氮釋放量。蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白屬于腸內營養(yǎng)制劑理

6、想的優(yōu)質蛋白原料，可用于配制腸內營養(yǎng)制劑。
　　本研究中以燙傷小鼠為實驗動物模擬術前術后病人對營養(yǎng)物質和能量的特殊需求，基于配方均衡設計原則，添加特殊營養(yǎng)物質 L-精氨酸、花生四烯酸、?；撬幔鞍踪|來源于蠶蛹蛋白和蠶蛹寡肽，配制蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸內營養(yǎng)粉劑，并壓制成片劑。制得的片劑每100g供能478.69Kcal，能量構成為蛋白質19.80%、脂肪40.02%、碳水化合物39.57%。
　　將蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸

7、內營養(yǎng)片劑投與燙傷小鼠模型，從體內免疫功能和炎癥反應方面研究SPPS1、SPPS2、SPPS3對小鼠的營養(yǎng)支持作用。將SPF級昆明種小鼠用5%TBSA致深Ⅱ度燙傷后隨機分為蠶蛹寡肽1腸內營養(yǎng)制劑組（Silkworm Pupae Peptide1 Enteral Nutrition Preparations Group, S1ENP）、蠶蛹寡肽型腸內營養(yǎng)制劑2組（Silkworm Pupae Peptide2 Enteral Nutrit

8、ion Preparations Group, S2ENP）、蠶蛹蛋白型腸內營養(yǎng)制劑組（Silkworm Pupae Protein Enteral Nutrition Preparations Group, S3ENP組）、立適康對照組、空白組和對照組。將用SPPS1、SPPS2、SPPS3配制的腸內營養(yǎng)制劑 S1ENP、S2ENP、S3ENP和立適康分別投與處理組，空白組和對照組投與普通鼠糧。每天觀察燙傷小鼠創(chuàng)面愈合情況，記錄皮膚結

9、痂時間和創(chuàng)面愈合時間，并記錄小鼠每日體重變化和存活率。燙傷小鼠2周后腹腔主動脈取血，檢測血清總蛋白和白蛋白、血清免疫球蛋白、血清內毒素、IL-6、TNF-α和T淋巴細胞總數(shù)及其亞群的濃度和數(shù)量。
　　燙傷小鼠2周后，S1ENP、S2ENP、S3ENP小鼠體重分別是33.12g、36.01g、33.84g，無顯著差異（P≥0.05），S2ENP、立適康組、對照組小鼠體重分別是36.01g、37.12g、37.63g，無顯著性差異（P

10、≥0.05）。S2ENP、立適康組的小鼠模型創(chuàng)面愈合情況良好，新生組織完整平坦。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組的TP指標值超過50g/L顯著高于對照組的TP值48.73 g/L（P＜0.05）；S2ENP組和立適康組Alb為30.08 g/L和30.17 g/L高于對照組Alb的27.62 g/L（P＜0.05）。SENP處理的三組IgA指標值為59.14μ g/ml、55.70μ g/ml、58.04μ g/ml，

11、與立適康組的IgA值56.94μ g/ml均無顯著差異，且與對照組IgA59.90μ g/ml差異不顯著（P≥0.05）；IgM、IgG的指標結果與IgA的結果分析類似，投與ENP的四組S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組無顯著性差異（P≥0.05）。ENP處理的S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組四組LPS指標均顯著高于對照組0.12 EU/ml（P＜0.05）。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立

12、適康組四組TNF-α的濃度與對照組的2.71ng/ml比較無顯著差異（P≥0.05）；S1ENP、S2ENP組的IL-6分別為2.53 ng/ml和2.47 ng/ml與立適康組的2.34 ng/ml比較無顯著差異（P≥0.05），對照組的IL-6含量為2.05 ng/ml顯著低于其他組（P＜0.05）。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組的T淋巴細胞亞群各指標值與立適康組均無顯著差異（P≥0.05）。本研究中配制得到的蠶蛹寡肽和蠶

13、蛹蛋白腸內營養(yǎng)片劑對燙傷小鼠的營養(yǎng)支持作用與立適康有類似的效果，較好的促進了燙傷小鼠創(chuàng)面的愈合情況。
　　由于嚴重創(chuàng)傷后機體易發(fā)生營養(yǎng)物質的合成代謝障礙，所以合理的提供充分的外源性營養(yǎng)物質，能對機體的合成代謝產生積極的促進作用，而腸內營養(yǎng)支持對全身炎癥反應綜合征以及由此所致的多器官功能不全有明顯的防治效果。本文設計的蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸內營養(yǎng)制劑可促進蛋白質合成，改善燙傷后免疫功能的低下，降低內毒素的移位，減輕燙傷后炎癥反應，