基因重組大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)蘇氨酸條件優(yōu)化.pdf

1、僅就作為飼料來說,蘇氨酸與賴氨酸、蛋氨酸和色氨酸齊名都是飼料中的限制性氨基酸,而且排名靠前,隨著賴氨酸的推廣和普遍添加,蘇氨酸逐漸成了,關(guān)鍵限制性氨基酸。目前從國際市場(chǎng)來看,蘇氨酸是需求量增長最快的氨基酸之一,但是我國的蘇氨酸生產(chǎn)從生產(chǎn)企業(yè)數(shù)量到發(fā)酵菌株產(chǎn)酸率再到蘇氨酸的提取率,都與國際先進(jìn)國家存在很大差距。本論文則是以一株基因重組的大腸桿菌為出發(fā)菌株,對(duì)其進(jìn)行種子培養(yǎng)條件和發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化,和復(fù)壯之后使其搖瓶發(fā)酵的產(chǎn)酸率由原來的30

2、.3g/L提高到41.2g/L,而IOL發(fā)酵罐中的產(chǎn)酸率由原來的70g/L提高到81.3g/L。主要工作包括以下幾個(gè)方面:
　　 種子培養(yǎng)條件的優(yōu)化,是為了獲取優(yōu)良種子,縮短發(fā)酵周期,提高設(shè)備利用率的必需步驟。本論文根據(jù)選取菌種的實(shí)際特點(diǎn),針對(duì)溶氧、碳源和pH的控制,從紗布層數(shù)、三角瓶的選擇、葡萄糖的添加、緩沖體系的構(gòu)建和谷胱甘肽的使用幾個(gè)方面進(jìn)行了嘗試,并最終在原有配方的基礎(chǔ)上,增添了緩沖體系,使得種齡提前了4小時(shí),縮短了發(fā)酵

3、周期。
　　 原始配方中,氮源只使用了硫酸銨這一無機(jī)氮源,本論文通過比較添加了玉米漿作為有機(jī)氮源,再經(jīng)過對(duì)蔗糖、硫酸銨和玉米漿的正交實(shí)驗(yàn)之后,將蘇氨酸的搖瓶產(chǎn)量提高了40％。
　　 基因工程菌與正常菌株或者誘變所得高產(chǎn)菌株相比,更容易退化,本課題中所選用的這株基因重組的大腸桿菌,便出現(xiàn)了生長緩慢,同等條件產(chǎn)酸下降的現(xiàn)象,于是,需要對(duì)其進(jìn)行菌株的復(fù)壯。經(jīng)過平板劃線篩選,最終從15株分離出來的大腸桿菌中,篩選出產(chǎn)酸最高的一株