重組大腸桿菌生產(chǎn)腸激酶的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩61頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、本文對重組大腸桿菌生產(chǎn)腸激酶進(jìn)行了研究。文章成功的構(gòu)建了兩株牛腸激酶輕鏈(sBEKLC)基因工程菌(BL21(DE3)/pET39-sBEKLC1KX和BL21(DE3)/pET39-sBEKLC1SX)。根據(jù)其構(gòu)建特點(diǎn)，考察了利用金屬螯合層析法和滲透沖擊法提取sBEKLC，結(jié)果顯示，利用滲透沖擊法得到了具有較強(qiáng)生物活性的sBEKLC粗酶液，而破胞后通過金屬螯和層析得到的sBEKLC融合蛋白沒有顯示生物活性。進(jìn)一步考察了IPTG、誘導(dǎo)溫

2、度和表達(dá)時(shí)間等條件對sBEKLC表達(dá)的影響。結(jié)果表明在優(yōu)化條件下，菌株BL21(DE3)/pET39-sBEKLC1SX在IPTG為0.1mM，誘導(dǎo)溫度為26℃，誘導(dǎo)培養(yǎng)8個(gè)小時(shí)時(shí)活性最高，BL21(DE3)/pET39-sBEKLC1KX則當(dāng)IPTG為0.2mM，誘導(dǎo)溫度為26℃，誘導(dǎo)培養(yǎng)8個(gè)小時(shí)時(shí)活性達(dá)到最高。對滲透沖擊所得到的粗酶液，進(jìn)行精制，得到了電泳純度在95％以上的sBEKLC1SX。5ng EKLC經(jīng)過16h能將20ug的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論