納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑的制備及體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文從以下幾部分展開： 第一部分納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑的制備及體外聚集顯影實(shí)驗(yàn)研究 目的：制備一種新型超聲造影劑-納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑，并研究其體外基本特性及聚集后增強(qiáng)超聲顯影性能，為其今后血管外超聲靶向顯像的研究提供依據(jù)。 方法：采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和高壓均質(zhì)技術(shù)制備一種納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑，觀察其外觀、形態(tài)、大小及分布情況，計(jì)算其濃度，并測(cè)定其粒徑、電位。進(jìn)一步制備生物素化微球，并以空白微球作為對(duì)照組

2、，分別在加入親和素前后，觀察體外聚集情況及超聲顯影效果，再采用DFY-Ⅱ型超聲圖像定量分析統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算、比較超聲圖像平均灰度值。 結(jié)果：所制備的液態(tài)氟碳微球造影劑外觀呈乳白色的混懸液，鏡下觀察，微球形態(tài)圓整，大小均一，性質(zhì)穩(wěn)定，粒徑在170nm左右； 制備的生物素化微球在加入親和素前未見聚集反應(yīng)，不能增強(qiáng)超聲顯影，加入親和素后可微球發(fā)生明顯的聚集，并于體外明顯增強(qiáng)超聲顯影，經(jīng)DFY-Ⅱ型軟件分析，加入親和素前后超聲圖像平

3、均灰度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：成功制備出穩(wěn)定的納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑，并采用生物素親和素法證明了該微球具有聚集后增強(qiáng)超聲顯影性能，為后期血管外超聲靶向顯影奠定基礎(chǔ)。 第二部分肝癌靶向液態(tài)氟碳微球體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究 目的：制備NBD標(biāo)記的生物素化液態(tài)氟碳微球，并將抗人肝癌細(xì)胞單克隆抗體HAb18生物素化，采用生物素親和素三步法，進(jìn)行體外靶向結(jié)合的研究。 方法：利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和高壓均質(zhì)技術(shù)制備NBD標(biāo)記的

4、生物素化液態(tài)氟碳微球造影劑，于熒光顯微鏡下觀察其形態(tài)、大小及熒光標(biāo)記情況；制備生物素化抗人肝癌細(xì)胞單克隆抗體HAb18，用HABA/Avidin試劑盒檢測(cè)抗體的生物素化程度，用細(xì)胞ELISA法檢測(cè)其免疫活性；培養(yǎng)7721肝癌細(xì)胞，采用生物素親和素三步法，進(jìn)行微球體外靶向結(jié)合實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：所制備的NBD標(biāo)記的生物素化液態(tài)氟碳微球外觀呈乳白色的混懸液，熒光顯微鏡下觀察，微球發(fā)明亮的綠色熒光；單抗HAb18生物素化后每分子抗體可結(jié)合的