氨基胍改善創(chuàng)傷性腦損傷大鼠對急性低壓低氧的耐受性.pdf

1、目的:創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)是死亡和致殘的主要原因之一,空運后送是其快速有效的救治手段,但低壓低氧環(huán)境使空運救治受到限制。低壓低氧會通過增加一氧化氮(NO)水平對正常生理產生有害影響,NOS抑制劑對此有明顯保護作用。本研究建立大鼠中度顱腦損傷(TBI)模型進行低壓低氧實驗,使用選擇性iNOS抑制劑氨基胍(AG)進行干預,通過TBI大鼠恢復期學習認知能力及運動能力等行為學變化、抗氧化物水平及腦組織抗細胞凋亡基因Bcl基因家族表達,探討低壓

2、低氧對TBI的影響及機制,為實驗研究和急救醫(yī)學提供依據。
　　方法:雄性Wistar大鼠49只,分兩批進行實驗,行為學實驗部分為29只大鼠,隨機分為4組:(1)陰性對照組(SHAM,n=5);(2)單純顱腦損傷組(FPI,n=8);(3)急性低壓低氧處理組(AHH,n=8);(4)氨基胍預處理組(AG,n=8),動物經過一周的適應性喂養(yǎng)及3天的轉棒訓練后建立顱腦損傷模型。RT-PCR實驗部分為20只大鼠,隨機分為4組:(1)陰性對

3、照組(SHAM,n=5);(2)單純顱腦損傷組(FPI,n=5);(3)急性低壓低氧處理組(AHH,n=5);(4)氨基胍預處理組(AG,n=5),動物經過一周的適應性喂養(yǎng)后建立顱腦損傷模型。采用液壓打擊法制作大鼠顱腦損傷(TBI)模型后,除 SHAM組外的其余3組大鼠放入動物低壓低氧艙,模擬海拔5000米,持續(xù)8小時低壓低氧處理,氨基胍預處理組在進艙前腹腔注射氨基胍100mg/kg。行為學實驗部分的大鼠采用轉棒和Morris水迷宮進行

4、行為學觀察,HE染色法觀察大鼠海馬 CA3區(qū)腦細胞形態(tài)學改變。RT-PCR實驗部分的大鼠采用RT-PCR技術檢測大腦皮層、海馬及小腦組織Bcl-2及Bax基因表達,生化法檢測血漿中NO、CAT、SOD、XOD、GSH、GSSG水平。
　　結果:與SHAM組相比,FPI組及AHH組轉棒成績及水迷宮潛伏期時間有明顯差異(P<0.05),表明其空間記憶和運動能力受損,而AG組行為學檢測結果提示該組大鼠空間記憶和運動能力有一定改善,差異有

5、統計學意義(P<0.05);第二批實驗結果顯示與SHAM組相比,AHH組NO水平顯著上升,CAT、SOD及GSH等抗氧化物下降(P<0.05),BCL-2基因表達下降,Bax基因表達提高(P<0.05);而AG組可逆轉急性低壓低氧造成的損傷效果。
　　結論:
　　(1)經急性低壓低氧處理的TBI大鼠腦組織病理改變較嚴重,運動協調能力及空間記憶能力顯著降低。
　　(2)急性低壓低氧使TBI大鼠血液NO產生明顯增加,抗氧化