血管內(nèi)皮祖細胞治療大鼠創(chuàng)傷性腦損傷的實驗研究.pdf

1、墾01‘一■■J■■■EI●^1■ll’■T11■～一1|一博士學位論文TITLE：蠟掀勰冀勰啪黼t舊hc㈣of№鼬I口j唧m]‘emsleR山Ⅲm㈣㈨h‰Ⅲ㈣FroggerQ№ⅣI一，’＼一級學科：臨床醫(yī)學≯‘睢j!互io神經(jīng)外科讖鎏鬻：：薹教授疰謄：蕁：j墨蓼!『f|『=r觶!焉囂蝸天津醫(yī)科人學博十學位論文關鍵詞：血管內(nèi)皮祖細胞歸巢創(chuàng)傷性腦組織提取液體外第三部分：MSCs來源的EPCs體內(nèi)移植治療腦外傷大鼠的研究目的：通過將獲得的骨

2、髓基質(zhì)細胞來源的血管內(nèi)皮祖細胞經(jīng)尾靜脈移機至創(chuàng)傷性腦損傷大鼠體內(nèi)，觀察細胞在體內(nèi)的歸巢情況，并研究這種細胞對肭損傷的治療作用和治療原理。方法：1建立大鼠液胍沖擊腦損傷模型：以前囟與人字縫中點，矢狀線左側(cè)25ram為中心致傷，沖擊壓力為13～20arm。2實驗動物分組：成年雌性大鼠，體重2803009，隨機分為4組：第一組為實驗組：創(chuàng)傷性腦損傷后24小時移植移植2106EPCs，第二組為對照組1：創(chuàng)傷性腦損傷后24小時移植移植2106MS

3、Cs，第三組為對照組2：創(chuàng)傷性腦損傷后24小時移植移植21003T3細胞，第四組為對照組3：假傷后24小時移植移植2X106EPCs。3細胞移植：移植的EPCs與MSCs來源于體重120“1509雄性大鼠，移植細胞前24小時按201amol／L的終濃度加入Brdu，移植前用PBS洗滌，將細胞密度調(diào)至4106／ml。細胞經(jīng)大鼠尾靜脈移植。4行為學觀察：對腦損傷后大鼠以mNSS標準進行傷后神經(jīng)功能評價。5組織學觀察：取大鼠腦組織、心、肺、肝

4、、脾、腎。腦組織以創(chuàng)傷為中心切取2個組織塊，并向前后各延一個組織塊。體部組織各取一組織塊。切片行HE染色及BrduBDNF、BrduVIII因子。6熒光原位雜交，利用雄鼠特異性基因Sry片斷設計檢測探針，監(jiān)測組織中的雄鼠來源的細胞在傷后雌鼠體內(nèi)的細胞分布。結(jié)果：1腦損傷模型：致傷各組大鼠死亡率及治療后第2天神經(jīng)功能評價無顯著性差異。2神經(jīng)功能評分：在治療后的第7天，神經(jīng)功能障礙情況丌始好轉(zhuǎn)，無論是實驗組還是對照組的mNSS評分均出現(xiàn)下降