S1在耐藥乳腺癌細胞中的分子藥理研究.pdf

1、碩士學位論文S1在耐藥乳腺癌細胞中的分子藥理研究ThepharmacologicalmechanismofS1ondrug—resistantbreastcancercells作者姓名：梁苤鎣學科、專業(yè)：生物化學與分子生物學學號：2叢8DO王——指導(dǎo)教師遠墮亟送圭超副塾拯完成日期_地!Q6DalianUniversityofTechnology大連理工大學碩士學位論文摘要惡性腫瘤對化療藥物多藥耐藥性的產(chǎn)生是困擾著各種腫瘤治療的共同難題，

2、在乳腺癌的治療中，它同樣也是導(dǎo)致化療失敗的重要原因。MCF7／ADR是在藥物敏感的乳腺癌細胞系MCF7的基礎(chǔ)上，經(jīng)化療藥物阿霉素長期誘導(dǎo)形成的多藥耐藥細胞系，它常被研究者們作為多藥耐藥的模型來尋求有效的治療藥物。BH3模擬物作為抗腫瘤新的治療策略，能夠通過競爭結(jié)合Bcl2家族抗凋亡蛋白的BH3疏水溝槽，釋放和激活促凋亡蛋白Bax／Bak，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。其中S1(3硫嗎啉基8氧8H苊并[1，2b]nl￡咯9腈)已經(jīng)被證明是一種低毒、高

3、效的抗腫瘤抑制劑。Sl具有廣譜的抗腫瘤活性，能以高的親和力結(jié)合Mcl1與Bcl2蛋白(58nM；310nM)，S1是一個特異的BH3模擬物，沒有Bcl2家族以外的靶點，只通過線粒體通路誘導(dǎo)完全依賴Bax／Bak蛋白的細胞凋亡。研究表明，BH3模擬物能夠在多種耐藥的腫瘤細胞中誘導(dǎo)凋亡。因此，BH3模擬物可能為腫瘤多藥耐藥的治療提供新的方案。本論文對BH3模擬物S1在多藥耐藥的乳腺癌細胞系MCF7／ADR中的分子藥理機制進行了研究。本研究以

4、藥物敏感乳腺癌細胞系MCF7和多藥耐藥細胞系MCF7／ADR為研究對象，首先通過MTT實驗，Western免疫檢測法等細胞生物學的方法證明，S1主要通過激活Bak蛋白高效誘導(dǎo)MCF7和MCF7／ADR細胞凋亡，并且在MCF7／ADR細胞中，S1表現(xiàn)出更高的凋亡誘導(dǎo)活性。另外，S1能夠在MCF7細胞中誘導(dǎo)Bcl2蛋白發(fā)生磷酸化(pBcl2)，體外FP實驗和基于細胞的Western免疫法實驗證明，S1不能拮抗pBcl2蛋白。然后進一步的通過

5、Bax／Bak的釋放與激活實驗證明，S1在MCF7細胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生的pBcl2，賦予了其對S1的相對抗性，而在MCF7／ADR細胞中此作用的缺失是導(dǎo)致其對S1作用更加敏感的原因。在此基礎(chǔ)上，通過S1在MCF7細胞和MCF7／ADR細胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激研究實驗證明，S1誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的差異是導(dǎo)致兩株細胞中pBcl2水平不同的原因。ERK特異性的抑制劑PD98059與S1的聯(lián)合作用證明，由S1在MCF7細胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對該細胞的保護作