2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、在該論文中,使用bldA基因的高效置換質(zhì)粒SCE25AT構(gòu)建天藍(lán)色鏈霉菌A2（2）菌株M145基因缺失突變體的過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了作為基因組測(cè)序模板的該菌株bldA不能置換,相應(yīng)基因型稱(chēng)bld<'->,代表bldA-dependent.為了闡明M145中bldA不能中斷的原因,首先嘗試使用鳥(niǎo)槍法,從bld<'->菌株天藍(lán)色鏈霉菌M600中隨機(jī)克隆bld基因.鳥(niǎo)槍克隆實(shí)驗(yàn)中得到共約15,000個(gè)轉(zhuǎn)化子,從其中篩選得到21個(gè)呈現(xiàn)光禿表型的鳥(niǎo)

2、槍克隆子;但抗性驗(yàn)證表明這21個(gè)鳥(niǎo)槍克隆子中并未攜帶bad基因.另一方面,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果暗示,M145中的bad突變有可能是顯性突變.為了探尋M145的145個(gè)含有TTA密碼子的ORF是否有必需基因,選擇其中5個(gè)ORF：SC4C6.27c、SCE25.32c、SCF62.25、SCH35.42c和SC6D7.05c,分別構(gòu)建了基因破壞結(jié)構(gòu)pHZ1111、pHZ115、pHZ1116、pHZ1118和pHZ1119.并利用這些破壞結(jié)構(gòu)得到了相

3、應(yīng)的基因缺失突變體WM1、WM5、WM6、WM8和WM9.抗性驗(yàn)證和表型觀察,發(fā)現(xiàn)這5個(gè)ORF不具有與鏈霉菌分化發(fā)育和產(chǎn)素等直接相關(guān)的基因功能.鳥(niǎo)槍克隆子pSPA1-a和SPA1-b有促進(jìn)bldA缺失突變株產(chǎn)株產(chǎn)素和氣生菌絲建成的作用.pSPA1-a中的3.1kb外源片段包含有兩個(gè)完整的ORF（SC7H2.26和SC7H2.27）和一個(gè)tRNA基因trnL-TTG.對(duì)trnL-TTG進(jìn)行亞克隆,得到亞克隆質(zhì)粒pHZW5.將pHZW5引入

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