蛋白酶體抑制劑MG132對HSC-T6細胞TGF-β-Smad信號通路的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究蛋白酶體抑制劑MG132對大鼠肝星狀細胞系HSC-T6細胞中TGF-β1、Smad3和Smad7表達的影響,探討泛素-蛋白酶體途徑在參與轉化生長因子-β/Smad(TGF-β/Smad)通路中信號調節(jié)的作用。
　　方法:體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細胞系HSC-T6細胞,用對數(shù)生長期的細胞來進行實驗。分別設對照組(MG132濃度為0)和不同濃度的MG132處理組,不同濃度的MG132處理細胞24h后,采用MTT法測定MG132對H

2、SC-T6細胞的生長增殖抑制作用,并計算抑制率及IC50值;采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(FQ-RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Westernblotting)檢測HSC-T6細胞中TGF-β1、Smad3和Smad7的mRNA和蛋白的表達水平。
　　結果:MG132對HSC-T6細胞的生長增殖具有明顯抑制作用,在濃度為0.5、1、2、2.5、3、5和10μmol/L時,其抑制率分別為10.02％、16.80%、20.18%

3、、23.22%、25.42%、44.53%和65.18%;與對照組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),IC50值為6.84μmol/L。濃度為1、2、3μmol/LMG132對HSC-T6細胞作用24小時后,TGF-β1和Smad3的mRNA水平成濃度依賴性減少(P<0.05),而各組Smad7的mRNA的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);同時TGF-β1和Smad3蛋白成濃度依賴性減少,而Smad7蛋白成濃度依賴性增加(P<

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