長鏈脂酰輔酶A合成酶抑制劑triacsin C 對HSC-T6細胞增殖的影響.pdf

1、目的：探討長鏈脂酰輔酶A合成酶（long-chain acyl-CoA synthetase，Acsl）抑制劑triacsin C對HSC-T6細胞增殖的影響。
　　方法：應(yīng)用不同濃度的Acsl抑制劑triacsin C作用HSC-T6細胞不同時間段；利用細胞計數(shù)試劑盒（cell counting kit-8，CCK-8）檢測triacsin C對HSC-T6細胞增殖的影響。同時，應(yīng)用實時熒光定量PCR（real-time qua

2、ntitative PCR，qPCR）檢測triacsin C作用HSC-T6細胞前后Acsl mRNA的表達。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度（500μg/L、1000μg/L、1500μg/L、2000μg/L）triacsin C作用HSC-T6細胞24 h，細胞存活率分別為（12.76±6.25）％、（17.91±9.31）%、（16.76±15.89）%、（12.22±13.50）%，48 h后細胞存活率分別為（1.

3、64±1.61）%、（0.64±1.82）%、（1.57±2.85）%、（0.19±2.59）%。在該濃度范圍內(nèi)，各時間段triacsin C對HSC-T6細胞增殖抑制作用顯著（P<0.05）。HSC-T6細胞生長抑制率隨著triacsin C作用時間延長而增加，但并未隨著triacsin C作用濃度增大而出現(xiàn)相應(yīng)改變。
　　2.較小劑量（1μg/L、10μg/L、100μg/L、1000μg/L）triacsin C作用HSC-

4、T6細胞24 h，細胞存活率分別為（85.40±11.13）%、（88.45±8.97）%、（34.96±6.23）%、（11.53±5.30）%，48 h后細胞存活率分別為（88.61±5.78）%、（92.86±8.03）%、（39.13±3.71）%、（2.36±0.70）%。1μg triacsin C作用24 h、10μg/L triacsin C作用24 h、48 h對HSC-T6細胞增殖無明顯抑制作用（P>0.05）。1μ

5、g triacsin C作用48 h對HSC-T6細胞增殖有明顯抑制作用（P<0.05）。在100μg/L、1000μg/L時，HSC-T6細胞生長抑制率隨著triacsin C作用濃度增加而增加，但并未隨著triacsin C作用時間延長而出現(xiàn)相應(yīng)改變。
　　3.更小劑量（0.01μg/L、0.1μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L）triacsin C作用HSC-T6細胞24 h，細胞存活率分別為（89.91±6.31）%

6、、（88.08±5.68）%、（85.33±6.68）%、（58.55±9.64）%，48 h后細胞存活率分別為（89.52±5.68）%、（92.75±3.60）%、（88.83±5.54）%、（62.80±4.85）%。在該濃度范圍內(nèi)，各時間段triacsin C作用各時間段對 HSC-T6細胞增殖抑制作用顯著（P<0.05）。在該濃度范圍內(nèi)，HSC-T6細胞生長抑制率并未隨著隨著triacsin C作用濃度增加和作用時間延長而出現(xiàn)

7、相應(yīng)改變。
　　4. Triacsin C作用HSC-T6細胞前，HSC-T6細胞中Acsl家族mRNA均有表達，其中Acsl5 mRNA表達量最高，相當于內(nèi)參GAPDH的（4.74±0.06）%，而Acsl6表達量最低，僅相當于Acsl5的0.04%。HSC-T6細胞中Acsl mRNA表達量的高低依次為Acsl5>Acsl3>Acsl4>Acsl1>Acsl6。
　　5.在100μg/L triacsin C作用HSC-

8、T6細胞24 h后，Acsl1、Acsl4表達降低，與DMSO組相比，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.在一定濃度范圍內(nèi)，triacsin C對HSC-T6細胞增殖有明顯的抑制作用，并呈現(xiàn)時間依賴性。
　　2. HSC-T6細胞中Acsl家族成員均有表達，但表達量不同，以Acsl5表達量最高，Acsl6表達量最低。
　　3. Triacsin C主要通過下調(diào)Acsl1、Acsl4的表達抑制HSC