脂氧合酶抑制劑NDGA對(duì)HepG2細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、目的：探討脂氧合酶抑制劑對(duì)HepG2細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制?！　》椒ǎ后w外培養(yǎng)HepG2肝癌細(xì)胞，應(yīng)用不同濃度脂氧合酶抑制劑去甲二氫愈創(chuàng)木酸(NDGA)處理HepG2細(xì)胞，利用MTT比色法、生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞克隆形成試驗(yàn)觀察NDGA對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖作用，HE染色、流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞凋亡并行細(xì)胞周期分析，細(xì)胞免疫化學(xué)或westernblot技術(shù)測(cè)定Caspase-3、PCNA、野生型p53(wtp53)、c-erbB-2蛋白

2、表達(dá)水平變化。　　結(jié)果：NDGA對(duì)HepG2細(xì)胞具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，不同濃度的NDGA(50、100、150、200)μmol/L處理HepG2細(xì)胞72h的抑制率分別為(27.34±5.95)％、(41.76±7.47)％、(57.08±4.36)％和(69.17±4.42)％，其IC50值為109.13μmol/L。細(xì)胞克隆形成率分別為(21.63±0.70)％、(17.33±0.96)％、(12.53±0.45)％、(7.97

3、±0.92)％，明顯低于對(duì)照組的(31.70±0.62)％，(P＜0.01)。同時(shí)，流式細(xì)胞術(shù)顯示NDGA可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡并使細(xì)胞周期被阻滯于G1期，NDGA(0、50、100、150、200)μmol/L作用HepG2細(xì)胞72h后，對(duì)照處理組(0μmol/L)沒有出現(xiàn)凋亡峰，其余各組(50、100、150、200)μmol/L均有凋亡出現(xiàn)，其凋亡率分別為(3.00±0.57)％，(6.38±0.40)％，(11.2±1.10)

4、％，(14.2±4.95)％，(P＜0.01)。細(xì)胞免疫化學(xué)、Westernblot分析顯示NDGA對(duì)HepG2細(xì)胞的PCNA、c-erbB-2蛋白表達(dá)有抑制作用，并可促進(jìn)Caspase-3、wtp53蛋白的表達(dá)?！　〗Y(jié)論：　　(1)NDGA可抑制HepG2肝癌細(xì)胞的增殖，使其生長(zhǎng)阻滯于G1期，并具有時(shí)間、劑量依賴性?！　?2)NDGA可誘導(dǎo)HepG2肝癌細(xì)胞凋亡。　　(3)NDGA對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用與上