FACL4抑制劑Triacsin C誘導肝癌細胞HepG2凋亡的機制研究.pdf

1、目的：已證實脂肪酸輔酶A連接酶4(fatty acid CoA．1igase 4，F(xiàn)ACL4)抑制劑Triacsin C對HepG2細胞有明顯凋亡誘導作用的基礎(chǔ)上，本實驗進一步探討其誘導凋亡的分子機制。 方法：體外培養(yǎng)HepG2肝癌細胞，Tdacsin C以不同濃度或不同時間干預后，應用流式細胞儀檢測細胞線粒體跨膜電位變化，應用免疫細胞化學S-P染色法檢測細胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、p53在細胞中的表達情況，應用比色法檢

2、測細胞凋亡相關(guān)蛋白酶Casepase-3、Casepase-8、Casepase-9的活性變化。 結(jié)果：1、流式細胞儀結(jié)合Rhodaminel23染色結(jié)果顯示Triacsin C作用后HepG2細胞線粒體跨膜電位下降，且呈時間、劑量依賴性。2、S-P免疫組化染色結(jié)果顯示：空白對照組HepG2細胞p53和Bcl．2蛋白均呈高表達，Bax呈相對低表達；Triacsin C作用后p53和Bcl．2蛋白表達下降，且p53較Bcl-2明顯

3、，Bax蛋白表達增加，上述變化均呈劑量依賴性，與對照組相比有顯著性差異(p<0.01)。3、比色法檢測發(fā)現(xiàn)Triacsin C誘導HepG2細胞凋亡過程中，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白酶活性呈時間依賴性及劑量依賴性增高，Caspase-3和Caspase-9增高尤其明顯，與對照組相比有顯著性差異(p<0.01)。 結(jié)論：1、FACL4抑制劑Triacsin C作用于HepG2細胞后線粒體膜電位明