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文檔簡介
1、目的:以大鼠肝星狀細胞株HSC-T6為實驗對象,通過以下三方面的實驗,研究苦參素對HSC-T6細胞株的影響并初步探討其發(fā)生機制。一、觀察苦參素對HSC-T6增殖的影響;二、檢測苦參素對HSC-T6活化的影響;三、檢測苦參素對端粒酶表達的影響。
方法:以濃度為2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL的苦參素分別作用于肝星狀細胞不同時間(24h、48h和72h),采用MTT比色法檢測苦參素對肝星狀細胞增殖的影響。用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶
2、鏈式反應(yīng)檢測與肝星狀細胞活化有關(guān)的指標:α-SMA、Ⅰ型膠原、Ⅲ型前膠原和TIMP-1mRNA的表達,同時檢測rTERTmRNA的表達變化。
結(jié)果:苦參素可以抑制肝星狀細胞的增殖,隨著作用濃度升高和時間的延長,苦參素對肝星狀細胞增殖的抑制作用逐漸增強。苦參素作用24h,加藥組組和對照組的α-SMA、ColⅠ、ColⅢ及TIMP-1mRNA表達的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而rTERTmRNA在苦參素組的表達高于對照組
3、,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)??鄥⑺刈饔?8h,濃度為6mg/mL苦參素組的α-SMA和TIMP-1mRNA表達低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但是ColⅠ、ColⅢ和rTERTmRNA表達和對照組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);苦參素作用72h,各苦參素組ColⅠ、ColⅢ和rTERTmRNA的表達與對照組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而4mg/mL和6mg/mL苦參素組的α-SMA和TIMP-1
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