阿司匹林對培養(yǎng)的HSC-T6細胞增殖與活化的影響及分子機制研究.pdf

1、目的: 采用不同濃度的阿司匹林干預體外培養(yǎng)的HSC-T6細胞，探討阿司匹林對HSC-T6細胞增殖與活化的影響及相關機制，為阿司匹林臨床新的應用提供進一步理論依據(jù)。
　　 方法: 將HSC-T6細胞培養(yǎng)于含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。采用MTT法測阿司匹林不同濃度組(1，5，10，15mmol/L)對細胞增殖情況的影響，光學顯微鏡下觀察各組HSC-T6細胞形態(tài)。根據(jù)結(jié)果將后續(xù)試驗分為對照組、低、

2、中、高阿司匹林組(1，3，5mmol/L)干預體外培養(yǎng)的HSC-T6細胞24h、48h、72h小時后，用RT-PCR法檢測α-SMA、ColⅠmRNA、COX-2、NF-κB、PPAR-γ的表達。1μmol/L LPS組、不同濃度的ASA(1，3，5mmol/L)+1μmol/L LPS干預HSC-T6細胞24h，用RT-PCR法測定各組COX-2、NF-κB、PPAR-γ的mRNA表達。
　　 結(jié)果:
　　 1.阿司匹

3、林對HSC-T6細胞增殖的影響
　　 阿司匹林對體外培養(yǎng)的HSC-T6細胞增殖有抑制作用，且隨著時間、劑量的增加，其抑制率也增加;在作用24h內(nèi)，濃度分別為1，5mmol/L時發(fā)現(xiàn)細胞增殖受抑制不明顯(P＞0.05);作用48h、72h后，阿司匹林能明顯抑制HSC-T6細胞增殖，存在時間和濃度依賴性。
　　 2.阿司匹林對HSC-T6細胞α-SMA、ColⅠ、COX-2、NF-κB、PPAR-γmRNA表達的影響

4、　　 (1)不同濃度ASA分別干預HSC-T6細胞24h，48h，72h，α-SMA、ColⅠ、COX-2、NF-κBmRNA表達均明顯降低，與對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，且隨濃度的增加降低更明顯，組間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 (2)不同濃度ASA分別干預HSC-T6細胞，24h組和48h組，PPAR-γ mRNA表達升高，與各自對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，隨濃度的增加升高更明顯，組間比

5、較P＜0.05;72h組:1mmol/L與對照組相比無顯著性差異P（P＞0.05），與3mmol/L和5mmol/L相比有顯著性差異(P＜0.05)，3mmol/L和5mmol/L與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），但兩組間相比無顯著性差異（P＞0.05）。
　　 (3)α-SMA/PPAR-γ相對表達量明顯降低，與對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，且隨濃度的增加降低更明顯，組間比較有顯著性差異（P＜0.05）。

6、r>　　 3.阿司匹林聯(lián)合LPS對HSC-T6細胞COX-2、NF-κB、PPAR-γ mRNA表達的影響
　　 (1)在LPS刺激下，與對照組相比，LPS組COX-2、NF-κ BmRNA表達明顯增強(P＜0.05)，濃度(1mmol/L，3mmol/L) ASA+LPS組COX-2、NF-κBmRNA表達同樣增強，與對照組相比P＜0.05;但增加的COX-2、NF-κBmRNA被ASA部分抑制，且隨著ASA濃度的增加抑制程

7、度增強，與LPS組相比P＜0.05。
　　 (2)在LPS刺激下，與對照組相比，LPS組可明顯增強PPAR-γmRNA表達(P＜0.05)，ASA+LPS組可明顯增強PPAR-γmRNA表達，與對照組和LPS組相比均P＜0.05，且隨著ASA濃度的增加，PPAR-γmRNA表達明顯增加。
　　 結(jié)論:
　　 1.阿司匹林能抑制HSC-T6細胞增殖。
　　 2.阿司匹林能降低肝纖維化指標α-SMA、ColⅠ