臨床分離鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)抗菌藥物耐藥性檢測(cè)和耐藥基因研究.pdf

1、引言：環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星等氟喹諾酮類(lèi)藥物常用于革蘭陰性桿菌感染的治療，隨著該類(lèi)藥物臨床應(yīng)用的增多，近年來(lái)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的耐藥越來(lái)越嚴(yán)重。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物耐藥的主要機(jī)制有兩種，一是氟喹諾酮類(lèi)藥物靶位的改變；二是細(xì)胞膜通透性的改變或（和）泵出機(jī)制的過(guò)分表達(dá)。且細(xì)菌耐藥性可以通過(guò)垂直或水平傳播等方式進(jìn)行播散。本研究通過(guò)對(duì)安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院分離的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的耐藥性分析，

2、對(duì)常見(jiàn)耐藥基因的檢測(cè)，了解本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的耐藥情況，探討細(xì)菌耐藥的分子生物學(xué)機(jī)制，為本地區(qū)開(kāi)展鮑曼不動(dòng)桿菌感染的防治、耐藥的監(jiān)測(cè)、傳染源的追蹤及傳播途徑調(diào)查等工作提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　 目的：調(diào)查醫(yī)院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌的分布和耐藥性，了解鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氟喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的常見(jiàn)耐藥基因型別和分子機(jī)制，為臨床抗感染治療提供依據(jù)，以指導(dǎo)臨床合理用藥。
　　 方法：采用VITEK系統(tǒng)鑒定細(xì)菌，采用Ki

3、rby-Bauer紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，并用M-H瓊脂定量稀釋法測(cè)定菌株對(duì)左氧氟沙星、環(huán)丙沙星和加替沙星三種氟喹諾酮類(lèi)藥物的MIC，PCR擴(kuò)增gyrA基因、parC基因和質(zhì)粒上的qnrA、B、S、氨基糖苷類(lèi)修飾酶aac(6’)-Ib及外排泵qepA基因，選取部分PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序分析。結(jié)果按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSL/NCCLS2008版) 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。應(yīng)用 WHONET 5.3軟件分析臨床標(biāo)本所分離的病原菌的分

4、布情況和藥敏結(jié)果。
　　 結(jié)果：從2007年10月到2009年10月，臨床標(biāo)本共檢出120株鮑曼不動(dòng)桿菌，多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌占臨床分離鮑曼不動(dòng)桿菌的80.0％(96/120)，中心重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)、呼吸科病房、急救中心分離菌所占比率分別為28.3％、24.2％、12.5％。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星的耐藥率分別為78.3 ％、58.3 ％和40.0％。PCR基因擴(kuò)增和測(cè)序結(jié)果：所有菌株均擴(kuò)增出了相應(yīng)gyr

5、A和parC基因產(chǎn)物，氨基糖苷類(lèi)修飾酶aac(6’)-Ib陽(yáng)性率達(dá)29.2％（35/120），但通過(guò)測(cè)序并未證實(shí)新氨基糖苷類(lèi)修飾酶aac(6’)-Ib-Cr的存在，未檢測(cè)出質(zhì)粒上的qnrA、B、S及外排泵qepA基因產(chǎn)物；耐藥株中的gyrA基因存在83位氨基酸密碼子突變，敏感株中則不存在該突變，并在耐藥株中發(fā)現(xiàn)gyrA和parC基因針對(duì)Genbank號(hào)分別為DQ270238和EU977576的菌株存在新的點(diǎn)突變。
　　 結(jié)論：合