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文檔簡介
1、目的:肝組織工程中胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)材料起著對種子細(xì)胞的支持、營養(yǎng)、信號(hào)交流等作用,是肝組織工程中的重要研究內(nèi)容。本文以木糖葡聚糖(Xyloglucan,XG)為ECM材料,研究其對人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁性以及對微囊化HepG2細(xì)胞的清蛋白合成速率、胺清除速率、細(xì)胞增殖速率以及Cx32(Connexin32,間隙連接蛋白)、E-cadherin(Epithelial-ca
2、dherin,細(xì)胞黏附分子)表達(dá)的影響。
方法:采用BCA法測定細(xì)胞在XG包被的細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁率;采用Human Serum Albumin Elisa kit、Ammonia Assay Kit分別測定不同濃度XG微囊化細(xì)胞的清蛋白合成速率、對體系中NH4+的清除速率;采用BCA法檢測微囊化細(xì)胞的增殖;采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcriptase-polymerasechain reaction,
3、RT-PCR)技術(shù)探究最適XG濃度微囊化細(xì)胞中Cx32、E-cadherin的表達(dá)情況。
結(jié)果:HepG2細(xì)胞在XG包被的細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁率隨著XG濃度的增加呈現(xiàn)增加的趨勢,同時(shí)微囊內(nèi)細(xì)胞數(shù)量隨XG濃度的增加、培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加,說明XG對細(xì)胞/基質(zhì)間相互作用具有促進(jìn)作用,可促進(jìn)細(xì)胞的生長增殖;微囊化HepG2細(xì)胞的清蛋白合成速率與胺清除速率在XG濃度為1mg/mL時(shí)最大且較空白組高,說明XG對細(xì)胞的合成、胺代謝功能具有一
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