Gfi-1的過量表達(dá)對(duì)32D細(xì)胞增殖和分化作用的研究.pdf

1、目的:探討Gfi-1(growth factor independent-1)基因的過量表達(dá)對(duì)小鼠粒-單祖細(xì)胞系32D細(xì)胞增殖和分化的作用，為進(jìn)一步研究Gfi-1基因在惡性血液病腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:制備含有EGFP的重組慢病毒載體三質(zhì)粒系統(tǒng)，包裝出完整的病毒顆粒并轉(zhuǎn)染32D細(xì)胞。通過IL-3撤退實(shí)驗(yàn)、低濃度IL-3增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)來觀察Gfi-1基因的過量表達(dá)對(duì)32D細(xì)胞的影響。
　　 結(jié)果

2、:包裝出完整的病毒顆粒并成功轉(zhuǎn)染32D細(xì)胞，流式細(xì)胞儀通過檢測(cè)綠色熒光蛋白分選出95[％]以上感染了慢病毒的32D細(xì)胞，RT-PCR凝膠電泳鑒定出有g(shù)fi-1基因條帶的表達(dá)；IL-3撤退實(shí)驗(yàn)顯示，轉(zhuǎn)染了Gfi-1的32D細(xì)胞(32D/gfi-1)于撤退后11天完全死亡、空病毒感染的32D細(xì)胞(32D/plox)在撤退后9天完全死亡而未做任何處理的32D細(xì)胞于撤退后6天完全死亡；低濃度IL-3增殖實(shí)驗(yàn)顯示，32D/gfi-1對(duì)IL-3的依