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1、巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(Microphagemigrationinhibitoryfactor,Mif)可抑制巨噬細(xì)胞的隨機(jī)遷移,是調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的重要細(xì)胞因子。已有報(bào)道表明MIF可調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化,并能夠促進(jìn)肥胖狀態(tài)下脂肪組織募集巨噬細(xì)胞,進(jìn)而引起炎癥反應(yīng)和胰島素抵抗。最近的研究發(fā)現(xiàn),肥胖狀態(tài)下骨骼肌組織中的巨噬細(xì)胞數(shù)目也會(huì)增多,但其發(fā)生機(jī)制和可引發(fā)的生物學(xué)效應(yīng)尚未清楚。鑒于其和能量代謝的密切關(guān)聯(lián),我們推測(cè)MIF可能會(huì)調(diào)控成肌細(xì)胞的增殖和
2、分化,在機(jī)體內(nèi)巨噬細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞互作網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
本課題利用體外成肌分化模型C2C12細(xì)胞,通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)超表達(dá)和敲減內(nèi)源Mif基因研究其對(duì)肌原細(xì)胞增殖和分化的調(diào)節(jié)作用,并通過流式細(xì)胞技術(shù)、RealtimePCR和WesternBlotting等方法對(duì)其分子機(jī)制進(jìn)行分析。本論文獲得的主要結(jié)果如下:
1.MifmRNA水平在C2C12細(xì)胞分化的早期(D0至D1)下降,而后持續(xù)上升,表明其可能在成肌
3、分化早期發(fā)揮作用。
2.免疫熒光結(jié)果顯示在C2C12細(xì)胞中超表達(dá)Mif可抑制成肌分化過程,影響肌管的形成。
3.敲減Mif可導(dǎo)致C2C12細(xì)胞阻滯在G1期,這種作用是通過下調(diào)CycinD1和CDK4的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。
4.在C2C12細(xì)胞中超表達(dá)Mif可下調(diào)MyoDmRNA水平,而敲減Mif則可上調(diào)其水平并能顯著降低Myf5的表達(dá),此外還可上調(diào)p21的表達(dá)。C2C12細(xì)胞經(jīng)MIF抑制劑ISO-1處理之后,Myo
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