黃瓜果實(shí)圓形性狀的SRAP分子標(biāo)記.pdf

1、果實(shí)形狀是黃瓜重要的外觀性狀之一。隨著人們消費(fèi)觀念的改變，特色黃瓜廣受消費(fèi)者的青睞。本研究結(jié)合特色黃瓜中的圓形新種質(zhì)，對(duì)黃瓜果實(shí)的圓形性狀進(jìn)行分子標(biāo)記研究，為黃瓜果實(shí)形狀分子標(biāo)記輔助育種提供理論基礎(chǔ)。 本試驗(yàn)以長(zhǎng)形少刺白皮黃瓜“B-2-2”和圓形無(wú)刺白皮黃瓜“Y-3”雜交組合構(gòu)建了F2群體。運(yùn)用該雜交組合所構(gòu)建的130株F2群體，利用BSA法結(jié)合SRAP標(biāo)記方法進(jìn)行黃瓜圓形性狀的相關(guān)連鎖分子標(biāo)記研究，主要研究結(jié)果如下：

2、長(zhǎng)形少刺白皮黃瓜“B-2-2”和圓形無(wú)刺白皮黃瓜“Y-3”的雜交后代F2群體的果實(shí)形狀呈連續(xù)分布，符合正態(tài)分布。采用改良CTAB法提取黃瓜基因組DNA，經(jīng)過(guò)1％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果顯示，基因組DNA的帶型整齊、清晰、明亮。建立了穩(wěn)定可靠的黃瓜SRAP體系：(12.5μL)反應(yīng)體系包含2.0 mmol/L，Mg2+，Taq酶0.5U，30 ng的模板DNA，0.96μmol/L的引物，200μmol/L，dNTP。 利用380

3、對(duì)引物組合對(duì)兩親本進(jìn)行了SRAP檢測(cè)，共篩選到184對(duì)多態(tài)性好的引物組合，多態(tài)率為48.4％。分別構(gòu)建黃瓜的圓果形DNA池與長(zhǎng)果形DNA池，利用篩選出的184對(duì)引物組合在長(zhǎng)果池DNA和圓果池DNA中進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)其中有34對(duì)引物組合在它們之間能擴(kuò)增出穩(wěn)定可重復(fù)性的多態(tài)性條帶，多態(tài)率為18.5％。用34對(duì)多態(tài)性引物，對(duì)長(zhǎng)果池和圓果池的各10個(gè)單株進(jìn)行重復(fù)性驗(yàn)證，其中有5對(duì)引物符合要求。 利用混合池中篩選出的5對(duì)多態(tài)性引物組合，在F

4、2群體的130株單株中進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)有3對(duì)引物產(chǎn)生的3條差異性條帶在F2群體中的分離比率基本為3:1，符合率達(dá)到80％以上，認(rèn)為是與黃瓜圓形果實(shí)性狀基因相關(guān)的SRAP標(biāo)記。 對(duì)所得到的3個(gè)標(biāo)記和F2代果形指數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析表明，標(biāo)記ME21/EM18與果形的相關(guān)系數(shù)為-0.183，相關(guān)性達(dá)到5％顯著水平；標(biāo)記ME8/EM14和標(biāo)記ME9/OD3與果形的相關(guān)性未達(dá)到5％顯著水平。由此推論，標(biāo)記ME21/EM18可能與控制圓形果實(shí)性