甘草和甘草酸防治小鼠哮喘的作用及其免疫學(xué)機制探討.pdf

1、[目的]本實驗的目的是建立小鼠慢性支氣管哮喘模型，研究甘草和甘草酸對慢性支氣管哮喘動物模型的療效，通過實驗證明甘草和甘草酸對哮喘機體氣道局部與整體免疫紊亂狀態(tài)的可能影響，試圖從免疫學(xué)角度探討其防治哮喘的作用機制。 [方法]選用100只雌性小鼠，體重(27±3)g，隨機分為5組：正常對照組(A組)，哮喘模型組(B組)，強的松組(C組)，甘草組(D組)，甘草酸組(E組)。建立小鼠慢性支氣管哮喘模型，HE染色觀察小鼠肺組織形態(tài)學(xué)變化和

2、免疫組織化學(xué)的方法檢測肺組織中eotaxin蛋白的表達，EOS計數(shù)，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測各組小鼠血清IFN-γ，IL-4和IgE的水平，鹽酸滴定法測定肺組織和血清中PLA2活性，測定胸腺和脾指數(shù)。所有的數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。 [結(jié)果]1.卵蛋白致敏和霧化吸入可致小鼠呈現(xiàn)慢性支氣管哮喘的病理學(xué)改變 用卵蛋白致敏小鼠3周及誘發(fā)哮喘4周后，病理切片鏡下可見支氣管粘膜腫脹充血，支氣管內(nèi)可見粘液栓，氣道上

3、皮下有大量嗜酸性粒細胞及淋巴細胞浸潤，氣道粘膜下組織水腫，纖毛上皮剝離，管腔阻塞。這些病理學(xué)改變與人類慢性支氣管哮喘的病理改變相似。 2.小鼠氣道上皮eotaxin蛋白表達的變化慢性支氣管哮喘小鼠氣道上皮中eotaxin蛋白表達較正常對照組明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。經(jīng)強的松治療后哮喘小鼠氣道上皮eotaxin蛋白表達下降(P＜0.05)，但仍高于正常對照組。甘草和甘草酸治療后氣道上皮eotaxin蛋白的表達也與

4、強的松相似。 3.小鼠外周血的EOS計數(shù)的變化慢性支氣管哮喘小鼠外周血的EOS計數(shù)高于正常對照組(P＜0.05)，經(jīng)強的松治療后EOS計數(shù)低于哮喘模型組(P＜0.05)，但仍高于正常對照組。甘草和甘草酸治療后EOS計數(shù)也與強的松相似。 4.小鼠血清IFN-γ的水平慢性支氣管哮喘小鼠的血清IFN-γ低于正常對照組(P＜0.05)，經(jīng)強的松治療后血清IFN-γ高于哮喘模型組(P＜0.05)。甘草和甘草酸治療后血清IFN-γ升

5、高也與強的松相似。 5.小鼠血清IL-4和IgE的水平慢性支氣管哮喘小鼠的血清IL-4和IgE高于正常對照組(P＜0.05)，經(jīng)強的松治療后血清IL-4和IgE低于哮喘模型組(P＜0.05)。甘草和甘草酸治療后血清IL-4和IgE降低也與強的松相似。 6.小鼠PLA2活性的變化慢性支氣管哮喘小鼠肺組織和血清PLA2活性高于正常對照組(P＜0.05)，經(jīng)強的松治療后肺組織和血清PLA2活性低于哮喘模型組(P＜0.05)。甘

6、草和甘草酸治療后PLA2活性降低也與強的松相似。 7.小鼠免疫器官指數(shù)的變化強的松治療后慢性支氣管哮喘小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)比正常對照組明顯減少(P＜0.05)，甘草、甘草酸組和正常對照組間無顯著性差異(P＞0.05)。 [結(jié)論]1.用卵蛋白致敏和霧化吸入可致小鼠呈現(xiàn)慢性支氣管哮喘的病理學(xué)改變，這種病理變化與哮喘患者相似。 2.慢性支氣管哮喘的小鼠具有氣道上皮eotaxin蛋白表達明顯增高；外周血的EOS明顯增高；

7、血清IFN-γ降低，IgE和IL-4明顯升高；PLA2活性升高等特點。 3.甘草和甘草酸能有效抑制慢性支氣管哮喘小鼠產(chǎn)生的氣道炎癥，減輕支氣管哮喘的病理學(xué)癥狀。甘草和甘草酸防治小鼠哮喘的作用與抑制氣道上皮eotaxin蛋白的表達；降低EOS；降低血清IL-4和IgE的濃度，升高IFN-γ的濃度；抑制PLA2活性有關(guān)。 4.甘草和甘草酸治療慢性支氣管哮喘療效和強的松基本相似，副作用較少，在哮喘的防治中可考慮與皮質(zhì)激素聯(lián)合應(yīng)