異甘草酸鎂抗皮炎濕疹藥效學(xué)及其抗炎機(jī)制研究.pdf

1、皮炎濕疹是臨床常見的皮膚病，發(fā)病率高，因其常伴有騷癢等癥狀嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。目前針對皮炎濕疹的藥物治療主要集中在激素和抗組胺類藥物的對癥治療，皮炎濕疹的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，加上這類藥物反復(fù)使用的副作用較明顯，使療效肯定且副作用較小的抗皮炎濕疹藥物的研發(fā)成為臨床的迫切需求。
　　 異甘草酸鎂注射液是第四代甘草酸制劑，系從天然甘草中提取的甘草酸經(jīng)堿催化異構(gòu)化后成鹽精制而得，是一種含有單一光學(xué)異構(gòu)體成分的甘草酸制劑，和前幾代甘草酸制劑相比具

2、有更好的抗纖維化、抗氧化和抗細(xì)胞凋亡等功效，目前臨床主要用于治療肝臟疾病。含甘草酸苷的美能注射液，臨床廣泛用于炎癥性疾病的治療，并已獲得批準(zhǔn)用于抗皮炎濕疹的治療，異甘草酸鎂注射液作為新一代甘草酸制劑在抗皮炎濕疹中的作用還沒有相關(guān)報(bào)道。
　　 因此異甘草酸鎂注射液抗皮炎濕疹的藥效學(xué)研究，能夠?yàn)槠鋺?yīng)用于臨床治療皮炎濕疹類疾病提供臨床前實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床抗皮炎濕疹治療提供新的選擇。在藥效學(xué)研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步的機(jī)制研究是對藥物和疾病的進(jìn)

3、一步了解，也是對機(jī)體功能和藥物作用途徑的了解，有助于新的藥物的發(fā)現(xiàn)和突破。
　　 本課題主要研究了以下內(nèi)容：
　　 第一部分：異甘草酸鎂注射液抗過敏性接觸性皮炎(allerge condactdermatitis，ACD)藥效學(xué)研究
　　 本研究通過2，4-二硝基氟苯(2,4-Dinitrofluorobenzene,DNFB)腹部致敏和耳部激發(fā)ICR鼠建立ACD模型。取48只ICR小鼠隨機(jī)分為6組：空白組，模型

4、組，高中低三個(gè)劑量組(異甘草酸鎂注射液20mg/kg，10mg/kg，5mg/kg)及陽性藥對照組(美能注射液8 ml·kg-1)，每組8只，以1％DNFB腹部脫毛部位致敏，3天后1％DNFB耳部激發(fā)，藥物治療從致敏后開始以尾靜脈注射給藥。測定指標(biāo)包括：給藥前后各鼠耳厚及耳紅腫情況，并進(jìn)行評分；以HE染色考察各組小鼠耳病理變化情況。同時(shí)通過ELISA實(shí)驗(yàn)考察血清中INF-γ，IgE，IL-1β，IL-4，及IL-8等炎性細(xì)胞因子變化情況

5、。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，異甘草酸鎂注射液能夠減輕模型耳部水腫紅斑程度和耳部腫脹度，緩解耳部組織炎癥性病理改變，降低部分血清炎性因子水平?？傮w上顯示了異甘草酸鎂抗過敏性接觸性皮炎具有明顯的治療作用，但這種治療作用和美能注射液沒有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 第二部分：異甘草酸鎂注射液抗慢性皮炎的藥效學(xué)研究
　　 本研究通過2，4-二肖基氯苯(DNCB)腹部致敏和耳部共四次激發(fā)BALB/c鼠建立慢性皮炎模型。取48只ICR

6、小鼠隨機(jī)分為6組：空白組，模型組，高中低三個(gè)劑量組(異甘草酸鎂注射液20mg/kg，10mg/kg，5mg/kg)及陽性藥對照組(美能注射液8ml·kg-1)，每組8只，以7％DNCB腹部脫毛部位致敏，3天后0.3％DNCB耳部激發(fā)，隔兩天激發(fā)一次，共激發(fā)四次，藥物治療從致敏后開始以尾靜脈注射給藥。測定指標(biāo)包括：給藥前后各鼠耳厚及耳紅腫情況，并進(jìn)行評分；以HE染色考察各組小鼠耳病理變化情況。同時(shí)通過ELISA實(shí)驗(yàn)考察血清中INF-γ，I

7、gE，IL-1β，IL-4，及IL-6等炎性細(xì)胞因子變化情況。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，異甘草酸鎂注射液能夠減輕慢性皮炎模型耳部水腫紅斑程度和耳部腫脹度，緩解耳部組織炎癥性病理改變，降低模型部分血清炎性因子水平?？傮w上顯示了異甘草酸鎂對慢性皮炎模型具有一定的治療作用，同時(shí)這種治療作用和美能注射液的治療作用沒有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 第三部分：異甘草酸鎂抗炎機(jī)制初步探索
　　 在藥效學(xué)研究基礎(chǔ)上，通過對建立的動物模型采

8、集的耳標(biāo)本作免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，異甘草酸鎂治療后耳局部組織TNF-α、IFN-γ和NF-κB表達(dá)有明顯的下降；培養(yǎng)人真皮成纖維細(xì)胞，以TNF-α刺激細(xì)胞激活NF-κB信號通路建立細(xì)胞模型，不同濃度異甘草酸鎂藥物干預(yù)，以免疫印跡技術(shù)檢測核因子NF-κB表達(dá)和激活，發(fā)現(xiàn)異甘草酸鎂能夠抑制NF-κB的激活過程，減少NF-κB轉(zhuǎn)位入核，減少細(xì)胞整體NF-κB的表達(dá)；通過報(bào)告基因技術(shù)，發(fā)現(xiàn)一定濃度異甘草酸鎂能夠抑制NF-κB的表達(dá)；同時(shí)在細(xì)胞模型基