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文檔簡介
1、目的:體外構(gòu)建非酒精性脂肪肝模型,研究對肝細胞內(nèi)相關(guān)炎性因子表達的影響及其對肝細胞內(nèi)UPR途徑的活化作用。進一步探討高脂肪乳負荷致肝細胞損傷的可能分子機制,觀察異甘草酸鎂是否對高脂肪乳負荷肝細胞有保護效應(yīng),為異甘草酸鎂用于治療非酒精性脂肪性肝病提供臨床前實驗依據(jù)。
方法:用含脂肪乳的細胞培養(yǎng)液培養(yǎng) L02肝細胞構(gòu)建非酒精性脂肪肝模型,以存活曲線、油紅 O染色及光鏡觀察評價構(gòu)建效率,篩選脂肪乳最佳作用濃度及孵育時間。以1mg/m
2、l異甘草酸鎂孵育非酒精性脂肪肝細胞。利用Real Time PCR檢測不同處理組肝細胞內(nèi)IL-6、IGF-1、TGF-β、bFGF及BIP、XBP-1和CHOP在mRNA水平的表達。
結(jié)果:(1)脂肪乳在一定濃度范圍內(nèi)對細胞起促脂肪化作用,但隨著作用濃度的提高,其有細胞毒性作用;以0.1％、0.2％濃度脂肪乳作為致肝細胞脂肪變性的最佳濃度,孵育時間為24h和48h;(2)高脂肪乳負荷肝細胞模型時,肝細胞內(nèi)IL-6、IGF-1、
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