環(huán)孢素A對冠心病患者T淋巴細胞共刺激分子CD40-CD40配體(CD40L)系統(tǒng)、CD134-CD134配體(CD134L)系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的:本實驗通過研究冠心病(CHD)患者共刺激分子CD40/CD40配體(CD40L)系統(tǒng)、CD134/CD134配體(CD134L)系統(tǒng)在CHD患者外周血CD4+T淋巴細胞上的表達情況，探究相關免疫機制在CHD中的作用，并體外應用不同濃度環(huán)孢素A(CSA)干預CD4+T淋巴細胞共刺激分子CD40/CD40L系統(tǒng)、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達，為以CD40/CD40L系統(tǒng)、CD134/CD134L系統(tǒng)為靶點的疾病治療提供切實有效的

2、數(shù)據(jù)，同時為利用免疫抑制劑治療CHD開展新的思路與方法。
　　方法:選擇2013年3月-2014年1月天津市胸科醫(yī)院心內(nèi)科收治的冠心病或疑診為冠心病患者71例，依據(jù)臨床表現(xiàn)及心電圖、超聲等診斷方法，按照疾病嚴重程度不同分為4組:急性心肌梗死組(AMI)19例、不穩(wěn)定型心絞痛組(UAP)18例、穩(wěn)定型心絞痛組(SAP)17例和17例正常對象為對照組(N);抽取正常對照組(17人)和冠心病組(54人)外周血，進行冠脈造影檢查及相關血液

3、生化指標測定并收集基礎資料，用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclearcells，PBMCs);利用流式細胞分析技術(shù)，分析各組PBMCs中CD4+T淋巴細胞上CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達百分率，篩選共刺激分子表達率最高的組別;在加入不同濃度CSA(濃度梯度:0、0.1、0.01、10μg/mL)的情況下，刺激培養(yǎng)共刺激分子表達率最高組別的PBMCs，培養(yǎng)72

4、小時后再次利用流式細胞分析技術(shù)，分析各亞組CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達百分率。本研究在細胞水平上評價CSA對CD4+T淋巴細胞共刺激分子CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)表達的影響。應用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析，P＜0.05差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:(1)各組間年齡、 LDL-C、Gensini積分、FT3、HDL-c等化驗指標比較，統(tǒng)計學上有顯著性差異(P＜0.05)，其中

5、年齡、LDL-C、Gensini積分在不同病變程度組間依次升高，F(xiàn)T3、HDL-c在不同疾病嚴重程度組間依次降低。各組間其余基礎資料比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。(2) CD4表達情況:與N組比較SAP組、UAP組、AMI組CD4表達均出現(xiàn)升高，且隨著病變程度的增加而增加，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001); CD40表達顯示:SAP組、UA組、AMI組CD40表達較N組升高且有統(tǒng)計學差異(P=0.001)，SAP組與UA組、AMI

6、組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，UA組與AMI組比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05); CD40L表達顯示:SAP組、 UA組、AMI組中CD40L表達較N組增高，表達百分數(shù)在不同病變程度組間依次升高，兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P=0.001)。CD134、CD134L分子表達情況:AMI組、UA組CD134表達較N組增高，且有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其余兩兩比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，CD134L表達在不同病變程度組

7、間進行兩兩比較結(jié)果均無顯著性差異(P=0.17)。(3)相關性分析:Gensini積分與CD40、CD40L表達量之間呈正相關(P=0.001)，即隨著Gensini積分的增加CD40、CD40L表達量也增加，與CD134、CD134L不相關(P=0.693/0.892)。(4)研究證實AMI組各種共刺激分子表達率最高，AMI組中CD40表達量在CSA干預濃度0.1μg/mL、1μg/mL組低于0μg/mL、0.01μg/mL組(P＜0

8、.01)，其余兩兩比較結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學意義(P=0.076/0.552);CD40L表達百分數(shù)在CSA干預濃度0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL組間兩兩比較均有統(tǒng)計學意義(P=0.001)，并隨CSA干預濃度的增加呈逐漸降低的趨勢，而0.1μg/mL組與1μg/mL組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.585);CD134及CD134L表達百分數(shù)在CSA不同干預濃度四組間顯示隨CSA干預濃度的增加呈逐漸降低的趨勢，但組間

9、兩兩比較結(jié)果顯示差異均無統(tǒng)計學意義(P=0.779/0.721)。
　　結(jié)論:正常人及冠心病患者外周血CD4+T淋巴細胞均可以表達共刺激分子CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)。相比較CD134/CD134L，CD40/CD40L系統(tǒng)通過免疫機制更多的參與冠心病的發(fā)生與發(fā)展，CD134、CD134L并無明顯作用;CSA通過抑制AMI患者外周血CD4+T淋巴細胞共刺激分子CD40/CD40L系統(tǒng)的表達，可以抑制動脈粥樣