粘細(xì)菌的分離純化、鑒定及生物活性物質(zhì)的篩選研究.pdf

1、粘細(xì)菌（myxobacteria）是原核生物中一類可滑行的革蘭氏陰性真細(xì)菌，形態(tài)特殊復(fù)雜，能夠在細(xì)胞間通過信號(hào)的傳遞與感應(yīng)，協(xié)同攝食、運(yùn)動(dòng)和發(fā)育形成子實(shí)體和抗逆性強(qiáng)的粘孢子，具有明顯的社會(huì)學(xué)特征。鑒于粘細(xì)菌能產(chǎn)生豐富的結(jié)構(gòu)特殊而新穎的生物活性物質(zhì)，而且具有其他微生物的代謝物所不具備的活性作用機(jī)制，使粘細(xì)菌成為目前新藥研發(fā)的一類重要藥物資源菌。
　　本研究通過處理來自河北（保定、遷徙、平泉、興隆和遵化）、福建（福州和漳州）、云南（昆

2、明）不同地區(qū)的230個(gè)樣品，在經(jīng)典的粘細(xì)菌分離純化方法的基礎(chǔ)上，針對(duì)粘細(xì)菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了方法上的改進(jìn)，共分離出200株粘細(xì)菌純培養(yǎng)物，其中29株具有纖維素降解活性。對(duì)其中40株粘細(xì)菌純培養(yǎng)物進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析，初步確定了其系統(tǒng)發(fā)育地位。另外，本研究還對(duì)部分粘細(xì)菌菌株的生物活性物質(zhì)進(jìn)行了篩選。
　　對(duì)40株粘細(xì)菌純培養(yǎng)物16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育分析，將37株歸屬于粘球菌屬（Myxococcus）、1株歸屬于珊瑚球菌屬（Coral

3、lococcus）和2株歸屬于匣狀球菌屬（Pyxidicoccus）。
　　對(duì)所得到的粘細(xì)菌純培養(yǎng)進(jìn)行了生物活性產(chǎn)物的篩選，采用3種以甲醇為唯一碳源的培養(yǎng)基對(duì)60株粘細(xì)菌菌株進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵，采用光譜學(xué)分析法及HPLC法篩選發(fā)酵液中的吡咯喹啉醌，獲得2株甲醇利用型吡咯喹啉醌產(chǎn)生菌，均歸屬于粘球菌屬（Myxococcus）；以香豆素為模型，從100株粘細(xì)菌中篩選到1株具有降解黃曲霉毒素潛在能力的菌株，16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析

4、結(jié)果顯示它與變金黃粘球菌（Myxooccus flavescens）相似度最高。其中菌株95032不僅可以產(chǎn)生吡咯喹啉醌，還具有黃曲霉毒素降解潛力。
　　以葡萄糖（Glu）、海藻糖（Fuc）、脫氧核糖（Rib）、果糖（Fru）、半乳糖（Gal）、甘露糖（Man）、木糖（Xyl）、赤蘚糖（Ery）、鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、山梨糖（Sor）、半乳糖醛酸（Gal acid）和半乳糖醇（Galactitol）為單糖標(biāo)準(zhǔn)品，采