ATF4對肝癌耐藥的影響.pdf

1、目的：在腫瘤中，活性轉(zhuǎn)錄因子4(ATF4)含量比在正常組織中要高出一個(gè)水平，其表達(dá)可被腫瘤微環(huán)境信號(如缺氧/無氧、氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等)上調(diào)?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，ATF4可進(jìn)一步影響乳腺癌、肺癌等惡性腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移及耐藥。然而其與肝癌耐藥性的關(guān)系仍不明確。因此，我們設(shè)想ATF4可能作為腫瘤治療中的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。我們的實(shí)驗(yàn)采用RNA干擾技術(shù)和含目的基因的質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)進(jìn)一步探討ATF4在HepG2和SMMC-7721細(xì)胞系中對5-Fu和

2、順鉑兩種化療藥物作用的影響。
　　 方法：培養(yǎng)HepG2和SMMC-7721兩種肝癌細(xì)胞系，通過RNA干擾技術(shù)和pcDNA3.1(一)-ATF4瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)分別沉默和過表達(dá)ATF4，然后給與5-Fu和順鉑繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞。采用RT-PCR和western blot法檢測ATF4 mRNA和蛋白質(zhì)的變化，主要通過胎盼藍(lán)染色計(jì)算活細(xì)胞數(shù)目的方法，分別比較ATF4沉默及過表達(dá)前后存活細(xì)胞數(shù)目的變化以分析ATF4在肝癌耐藥中的作用。