雞球蟲(chóng)的分離鑒定及預(yù)防雞球蟲(chóng)病中草藥復(fù)方制劑的研究.pdf

1、雞球蟲(chóng)病是由艾美耳屬一種或多種球蟲(chóng)寄生于雞體內(nèi)所引起的呈世界性分布的寄生蟲(chóng)病，該病對(duì)雛雞的危害十分嚴(yán)重，給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。雞球蟲(chóng)種類多，且臨床多呈混合感染，其中致病性最強(qiáng)的是柔嫩艾美耳球蟲(chóng)。本研究從病雞盲腸內(nèi)分離球蟲(chóng)，并采用形態(tài)學(xué)方法進(jìn)行鑒定；通過(guò)研究單味中草藥對(duì)球蟲(chóng)孢子生殖的影響，篩選出具有抗球蟲(chóng)活性的中草藥，根據(jù)單味中草藥篩選結(jié)果、球蟲(chóng)生物學(xué)特性及雞的生理特點(diǎn)，研制預(yù)防雞球蟲(chóng)病的中草藥復(fù)方制劑，并對(duì)中草藥復(fù)方制劑抗球蟲(chóng)效

2、果進(jìn)行研究。 1.從合肥市肥西縣選擇具有盲腸球蟲(chóng)病典型癥狀的病雞，取其盲腸內(nèi)容物，用沉浮法收集柔嫩艾美耳球蟲(chóng)的野外混合株，加入適量的2.5％重鉻酸鉀水溶液，置于29℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行人工雞體增殖，查閱有關(guān)資料，分別對(duì)野外檢獲和雞體增殖后的兩代球蟲(chóng)卵囊進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。測(cè)得第一代(n=50個(gè))卵囊的大小為18.4～25.5μm×14.6～20.2μm，平均大小為21.62±2.08μm×18，15±1.83μm。卵形

3、指數(shù)為1.19。孢子囊大小為10.5～12.6μm×5.1～6.8μm，平均大小為11.77±0.87μm×6.29±0.69μm。第二代(n=50個(gè))卵囊的大小為19.5～26.2 μm×16.5～21.5μm，平均大小為22.05±1.98μm×18.58±1.85μm，卵形指數(shù)為1.18，孢子囊大小為10.4～12.8μm×4.8～7.5 μm，平均大小為11.85±0.9lμm×6.31±0.72 μm。對(duì)兩代孢子化卵囊的測(cè)量數(shù)

4、據(jù)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)(F檢驗(yàn))，其結(jié)果差異不顯著，而且第二代球蟲(chóng)的寄生部位和病理變化與第一代相同，符合柔嫩艾美耳球蟲(chóng)的特征，因此初步鑒定本試驗(yàn)分離的球蟲(chóng)為柔嫩艾美耳球蟲(chóng)(Eimeria tenella)。 2.選取苦參、檳榔、川楝子、鶴虱、貫眾等23味中草藥，進(jìn)行單味中草藥對(duì)柔嫩艾美耳球蟲(chóng)孢子生殖影響的研究。按照中草藥制劑研制工藝，分別將每味中草藥研制成濃度在1.1～1.15 g/mL的濃縮提取液，對(duì)其體外抑制球蟲(chóng)卵囊孢子化的效

5、果進(jìn)行觀察，篩選出商陸、常山、柴胡、白頭翁等抑制球蟲(chóng)卵囊孢子化作用較強(qiáng)的中草藥。 3.從單味中草藥體外抑制球蟲(chóng)卵囊孢子化試驗(yàn)的結(jié)果中篩選出研制復(fù)方制劑的主藥，結(jié)合球蟲(chóng)的生物學(xué)特性和雞的生理特點(diǎn)，再根據(jù)中醫(yī)藥理論的組方配伍原則進(jìn)行組方。第一次組方經(jīng)雞體試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果對(duì)組方進(jìn)行調(diào)整。第二次組方再經(jīng)雞體試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果又對(duì)組方進(jìn)行適當(dāng)加減，并進(jìn)行第三次雞體試驗(yàn)。通過(guò)三次雞體試驗(yàn)篩選出一個(gè)預(yù)防雞球蟲(chóng)病效果較好的組方，該組方由商陸8

6、份、白頭翁4份、常山2份、仙鶴草3份、金銀花3份等組成，其綜合抗球蟲(chóng)指數(shù)(ACI)達(dá)到188.1，抗球蟲(chóng)效果優(yōu)于化學(xué)合成藥氨丙啉(對(duì)照組氨丙啉ACI為182.1)。最后，進(jìn)行了中草藥復(fù)方制劑療效試驗(yàn)。以柔嫩艾美耳球蟲(chóng)孢子化卵囊接種雛雞，研究中草藥復(fù)方制劑對(duì)球蟲(chóng)感染雞血液生理生化指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，除血液超氧化物岐化酶變化不明顯外，球蟲(chóng)感染后，引起雞血清葡萄糖、鎂、鈉、總蛋白、白蛋白、琥珀酸脫氫酶、淀粉酶、堿性磷酸酶含量明顯下降；血清鈣

7、、一氧化氮、溶菌酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量升高；雞體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，IgG、IgM、IgA含量升高。中草藥能夠維持血糖等指標(biāo)穩(wěn)定在較正常水平，并能明顯提高溶菌酶等指標(biāo)的水平。同時(shí)，還進(jìn)行了中草藥復(fù)方制劑預(yù)防雞球蟲(chóng)病田問(wèn)試驗(yàn)，結(jié)果表明，中草藥復(fù)方制劑能夠明顯降低雞球蟲(chóng)病的發(fā)病率和死亡率，還能夠顯著促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)，提高飼料轉(zhuǎn)化率。 綜上所述，本文成功地分離并鑒定出柔嫩艾美耳球蟲(chóng)，研制出一個(gè)預(yù)防雞球蟲(chóng)病的中草藥復(fù)方制劑。所研制的中草藥