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1、目的:比較有高血壓家族史(FH+)和無高血壓家族史(FH-)的人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(human umbilical artery smooth muscle cells,hUASMCs)鈉泵、鈣泵活性和亞單位mRNA表達(dá)的差異;比較兩種家族史的hUASMCs培養(yǎng)上清液中血管緊張素II(angiotensin II,Ang II)和內(nèi)皮素(endothelin,ET)濃度的差異;比較不同劑量血管緊張素II(angiotensinII,Ang
2、 II)對(duì)兩種家族史hUASMCs兩種離子泵活性和mRNA表達(dá)的影響;探討家族史和Ang II與離子泵的關(guān)系。
方法:以FH+的hUASMCs為研究對(duì)象,以FH-的hUASMCs為對(duì)照,分別用生化酶學(xué)方法和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測(cè)兩組細(xì)胞Na+,K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性和mRNA相對(duì)表達(dá)量;用放射免疫法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中Ang II和ET的含量;兩種家族史平滑肌細(xì)胞分別給予Ang II(1×10-
3、7,1×10-6mol/L)干預(yù)24小時(shí),再用上述方法檢測(cè)兩種細(xì)胞Na+,K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性和mRNA相對(duì)表達(dá)量。
結(jié)果:FH+組hUASMCs培養(yǎng)上清液中Ang II、ET濃度與FH-組無差異。用AngII干預(yù)前,F(xiàn)H+組hUASMCs膜Na+,K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性均高于FH-組(p<0.05),但兩組hUASMCs膜Na+,K+-ATPaseα1-subunit m
4、RNA表達(dá)和質(zhì)膜Ca2+-ATPase(plasma membrane Ca2+-ATPase,PMCA)亞型1(PMCA1)mRNA表達(dá)與FH-組無差異。用AngII干預(yù)后,在FH-組,AngII(1×10-7mol/L)能提高兩種離子泵活性和上調(diào)其mRNA表達(dá)水平(p均<0.01),AngII(1×10-6mol/L)能抑制兩種離子泵活性和下調(diào)其mRNA表達(dá)水平(p均<0.01);在FH+組,AngII(1×10-7)能抑制兩種離子
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