瑞舒伐他汀對(duì)人臍靜脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在探討瑞舒伐他汀對(duì)人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖的影響,進(jìn)而研究其抗動(dòng)脈粥樣硬化作用機(jī)制,并為冠狀動(dòng)脈性心臟病的治療及預(yù)防支架再狹窄提供細(xì)胞學(xué)理論依據(jù)。
　　 方法:瑞舒伐他汀作用于對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs的實(shí)驗(yàn)濃度為0、1、2、3、4、5、6μmol/L,測(cè)定時(shí)間點(diǎn)分別為瑞舒伐他汀作用24、48、72小時(shí)。
　　 1、用四甲基偶氮唑藍(lán)還原反應(yīng)(MTT法)測(cè)定瑞舒伐他汀在不同濃度下對(duì)TGF-β

2、1誘導(dǎo)的人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的增殖抑制效應(yīng)。
　　 2、應(yīng)用流式細(xì)胞儀分別測(cè)定一定劑量的瑞舒伐他汀在不同時(shí)間下誘導(dǎo)人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)發(fā)生凋亡的作用。
　　 3、應(yīng)用熒光顯微鏡從形態(tài)學(xué)上觀察瑞舒伐他汀誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的情況。
　　 4、所得數(shù)據(jù)使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。
　　 結(jié)果:
　　 1、MTT結(jié)果顯示VSMC與TGF-β1共同孵育后生長(zhǎng)旺盛,呈現(xiàn)細(xì)胞增多。當(dāng)

3、TGF-β1濃度為0.06ng/mL時(shí),對(duì)刺激VSMC增殖的作用最明顯。瑞舒伐他汀對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞具有增殖抑制作用,并具有一定的時(shí)間和劑量依賴性。
　　 2、流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示瑞舒伐他汀可以誘導(dǎo)VSMC凋亡。4μmol/L的瑞舒伐他汀作用于TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs24h、48h、72h的凋亡率分別為(14.88±1.46)％、(18.45±0.97)％、(19.21±0.35)％,與對(duì)照組相比細(xì)胞凋亡率明顯

4、增加(P＜0.05),且隨時(shí)間延長(zhǎng)凋亡細(xì)胞逐漸增多。
　　 3、在瑞舒伐他汀作用后,經(jīng)碘化丙啶染色,熒光顯微鏡下觀察可見(jiàn):未經(jīng)藥物處理的細(xì)胞核表面光滑,發(fā)出的熒光均勻,藥物處理后細(xì)胞呈現(xiàn)紅色熒光。
　　 結(jié)論:
　　 1、瑞舒伐他汀具有抑制TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs增殖的作用,給藥濃度與作用時(shí)間是影響VSMCs增殖的主要因素。
　　 2、瑞舒伐他汀具有增加TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs凋亡率的作用;當(dāng)藥物