維生素C二步發(fā)酵伴生菌的篩選及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、維生素C二步發(fā)酵法，第一步由單菌發(fā)酵將D-山梨醇轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-山梨糖，第二步由產(chǎn)酸菌氧化葡萄糖酸桿菌與伴生菌臘狀芽孢桿菌混合發(fā)酵將L-山梨糖轉(zhuǎn)化為2-酮基-L-古龍酸(維生素C前體)。 本文通過(guò)對(duì)來(lái)源不同的蘇云金芽孢桿菌進(jìn)行分離、純化、蟲(chóng)體復(fù)壯處理、遺傳穩(wěn)定性考察，篩選出一株新的伴生菌與生產(chǎn)用小菌氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobactet oxydans)組成新菌系B15-14，并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：新組合菌與生產(chǎn)

2、用菌系25B相比，搖瓶發(fā)酵周期縮短4h，糖酸轉(zhuǎn)化率提高5.5個(gè)百分點(diǎn)，經(jīng)傳代穩(wěn)定性考察，性狀穩(wěn)定。 維生素C新組合菌系B15-14的生長(zhǎng)特性及發(fā)酵特性為：新混合菌系B15-14在種子培養(yǎng)基中一個(gè)明顯的特點(diǎn)就是對(duì)數(shù)期長(zhǎng)，同一時(shí)期大小菌之間的數(shù)量比例低于生產(chǎn)菌系；在發(fā)酵過(guò)程中新菌系B15-14中小菌生長(zhǎng)速度明顯快于CK，菌體總生物量增加也較快。 為了更好的發(fā)揮新組合菌系B15-14的發(fā)酵潛能，我們對(duì)其單因素發(fā)酵條件進(jìn)行了研究

3、，結(jié)果表明：新組合菌系B15-14最適種齡為22～24h，最適接種量為10～15％，250ml搖瓶最適裝液量為20ml，最適起始山梨糖濃度為8％，最適發(fā)酵溫度為29℃～31℃，最適初始pH值為6.7～7.0。 利用均勻設(shè)計(jì)對(duì)新菌系B15-14發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明：在實(shí)驗(yàn)選定的條件范圍內(nèi)，最適發(fā)酵培養(yǎng)基成分配比為玉米漿3.02％、KH2PO4 0.25％、MgSO4 0.03％、尿素0.43％。以生產(chǎn)菌系25B為對(duì)照，新