兔產(chǎn)氣莢膜梭菌病、大腸桿菌病病原的分離鑒定及其二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研制.pdf

1、兔產(chǎn)氣莢膜梭菌、大腸桿菌是引起幼兔細(xì)菌性腹瀉的最主要的兩種病原菌，由它們引起的幼兔腹瀉發(fā)病率和死亡率均較高，給兔業(yè)養(yǎng)殖戶帶來重大經(jīng)濟(jì)損失。為了更好地控制疾病，我們從不同兔場具有典型癥狀的患病兔病料中分離出了兔產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌，并進(jìn)行鑒定，篩選免疫原性較優(yōu)的菌株作為菌種制作二聯(lián)油乳劑苗對兔的這兩種傳染病進(jìn)行預(yù)防，取得了良好效果。研究內(nèi)容如下： 兔產(chǎn)氣莢膜梭菌病病原的分離鑒定對20份可疑病兔病料進(jìn)行病原菌分離鑒定，共分離到17

2、株有莢膜、有芽孢的革蘭氏陽性粗大桿菌，分離菌株在綿羊全血瓊脂平板上培養(yǎng)后形成雙溶血圈。動物回歸試驗(yàn)證實(shí)，分離菌可致兔發(fā)病死亡，并從試驗(yàn)致死兔病料中分離到了與自然病例相一致的細(xì)菌，結(jié)合臨床癥狀、病理變化、生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果等，判定其為兔A型產(chǎn)氣莢膜梭菌。 兔大腸桿菌病病原的分離鑒定從6個(gè)兔場送檢的發(fā)病兔病料中分離到27株革蘭氏陰性球桿菌，菌落在麥康凱瓊脂平皿上成紅色，生化試驗(yàn)結(jié)果均符合大腸桿菌特征，結(jié)合病理變化，確定病原菌為

3、大腸桿菌，分離菌對青霉素、氨芐青霉素耐受，對其它藥物敏感程度存在較大差異。經(jīng)致病性試驗(yàn)篩選出21株致病性菌株，經(jīng)血清型鑒定，21株大腸桿菌分屬O<,26>(4.7％)，O<,18>(19.1％)，O<,103>(28.5％)，O<,109>(33.3％)，O<,85>(4.7％)，O<,142>(4.7％)幾個(gè)血清型。在這6個(gè)血清型中，O<,103>，O<,109>，O<,18>占定型菌株的80.9％。 兔產(chǎn)氣莢膜梭茵病型、大腸

4、桿菌病二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研制用上述鑒定過的兔產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌作為制苗菌種接種適宜培養(yǎng)基進(jìn)行大量增殖，采用膜過濾的方法進(jìn)行濃縮，經(jīng)甲醛滅活，按一定比例加入佐劑，制成兔產(chǎn)氣莢膜梭菌及大腸桿菌病多價(jià)二聯(lián)油乳劑滅活苗。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)研究證明，該二聯(lián)苗穩(wěn)定性好，使用安全。實(shí)驗(yàn)動物免疫后21天攻毒，對產(chǎn)氣莢膜梭菌病的保護(hù)率為91.6％對大腸桿菌保護(hù)率為83.3％。如東某兔場200多只仔兔免疫接種該二聯(lián)苗后，6個(gè)月來未發(fā)現(xiàn)一例可疑病例，有效預(yù)