鴨疫里默氏桿菌、大腸桿菌二聯(lián)多價蜂膠疫苗的研制及其免疫應答反應的動態(tài)研究.pdf

1、鴨疫里默氏桿菌感染和大腸桿菌病在臨床上常以混合感染的形式出現，死亡率高，飼料轉化率低，治療代價高，給養(yǎng)鴨業(yè)造成極大的經濟損失。本試驗采用四川地區(qū)鴨疫里默氏桿菌(RA)優(yōu)勢菌株(B18、B112、B115)和禽大腸桿菌(E-Coli)常見標準血清型(O1、O2、O18、O78)成功研制了鴨疫里默氏桿菌、大腸桿菌二聯(lián)多價蜂膠滅活疫苗，通過篩選確定了該疫苗的最佳免疫劑量為疫苗中每株菌的含量達到1x109CFU/mL，0.5mL/只，4℃可保存

2、10個月以上，免疫鴨首免后7dRA和E-Coli的攻毒保護率分別為60％和50％，二免后7dRA和E-Coli的攻毒保護率分別為90％和70％。 本實驗通過淋巴細胞轉化試驗(MTT比色法)研究細胞免疫，間接ELISA檢測免疫鴨外周血抗體水平，從而評價RA、E-Coli二聯(lián)蜂膠疫苗在鴨體內免疫應答的動態(tài)反應性。MTT比色法(采用含10％小牛血清和5μg/mLConA的RPMI-1640于39℃培養(yǎng)66h)結果顯示首免后3d、6d、

3、9d和13d免疫組的淋巴細胞轉化效果均顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)高于對照組，于首免后6d達到峰值。2次免疫組高于1次免疫組，但差異不顯著(P＞0.05)；首免后20d和27d1次免疫組和2次免疫組與對照組相比均差異不顯著(P＞0.05)。由此可見，蜂膠疫苗可極顯著地增強免疫鴨血液中的T淋巴細胞轉化效果，但這種增強作用是短暫的，維持時間不到3周。 抗體水平檢測于首免后3d、6d、9d、13d、20d、27d、34

4、d、41d、48d、55d和69d進行。用單株菌的超聲波裂解抗原包被酶標板測定其在免疫鴨體內抗體水平的動態(tài)反應性，結果顯示雛鴨免疫后3d即可產生免疫力，RA和E-Coli共7株菌的抗體水平均隨著時間的延長逐漸升高，2次免疫組的抗體水平從第13d開始顯著(P＜0.05)高于1次免疫組，并在20d左右達到峰值，這種高抗體水平維持至免疫后第48d，之后逐漸下降，1次免疫組和2次免疫組第69d的抗體水平均高于同組免疫后第13d的抗體水平。本試驗