鴨疫里默氏桿菌二價(jià)滅活疫苗生產(chǎn)工藝研究.pdf

1、鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer, RA）引起的鴨傳染性漿膜是家鴨、火雞和多種其它鳥類的一種接觸傳染性疾病。該病呈世界范圍分布，幾乎已在所有集約化養(yǎng)鴨生產(chǎn)的國(guó)家發(fā)現(xiàn)。該病的發(fā)病率和死亡率較高，已成為目前危害世界各國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一，給養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。
　　鴨疫里默氏桿菌根據(jù)表型特征、生化特征和分子生物學(xué)特征進(jìn)行鑒定和分類。到目前為止，國(guó)際上報(bào)道鴨疫里默氏桿菌共有21個(gè)血清型。在眾

2、多的血清型之間，幾乎沒有交叉免疫保護(hù)性，給疫苗的研發(fā)帶來了困難。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，我國(guó)所有RA發(fā)病血清型中，血清1型和血清2型約占50％。本研究通過選擇發(fā)病地區(qū)鴨場(chǎng)流行的優(yōu)勢(shì)血清型菌株進(jìn)行疫苗研究，確定了鴨疫里默氏桿菌適宜的增菌培養(yǎng)基，建立了高密度發(fā)酵RA的液體培養(yǎng)技術(shù)，確定了鴨疫里默氏桿菌病滅活疫苗的生產(chǎn)工藝規(guī)程。
　　本研究生產(chǎn)使用的發(fā)酵培養(yǎng)罐為賽多利斯(Sartorius)BIOSTAT D-DCU系列，培養(yǎng)基為含3％小牛血

3、清的TSB，pH7.3，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為37℃，溶氧35％，發(fā)酵過程中不用調(diào)節(jié)pH，發(fā)酵時(shí)間為10h～11h，活菌數(shù)可達(dá)2.5×1010CFU/ml～3.0×1010CFU/ml。
　　鴨疫里默氏桿菌在制備成滅活疫苗后，效力檢驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)強(qiáng)毒攻擊能產(chǎn)生100％保護(hù)(10/10)。疫苗免疫后21天，針對(duì)SG4株的抗體效價(jià)在7.7～8.5 log(2)之間，顯著高于針對(duì)ZZY7株抗體效價(jià)(3.0～3.4 log(2))，3個(gè)批次疫苗之間