左卡尼汀對環(huán)孢素A所致胰腺和腎臟損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討左卡尼汀(L-carnitine,L)對環(huán)孢素A(CsA)所致胰腺和腎臟損傷保護(hù)作用的分子機(jī)制。
　　方法：SD大鼠隨機(jī)分為六組:
　?、僬φ战M;
　　②正常對照組+L(50mg/kg/d);
　?、壅φ战M+L(200mg/kg/d);
　?、苈訡sA腎毒性組;
　?、軨sA腎毒性+L(50mg/kg/d);
　?、轈sA腎毒性組+L(200mg/kg/d)。
　　低鹽

2、飼料喂食下皮下注射CsA(15mg/kg/d)4周建立慢性CsA腎毒性大鼠模型；治療組同時(shí)給予CsA和L。L對胰腺損傷的影響分別檢測各組小鼠的血糖、血胰島素水平、糖化血紅蛋白、腹腔葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)、胰腺自噬相關(guān)蛋白LC3-II的表達(dá)；L對腎臟損傷的影響分別檢測腎功能、腎小管間質(zhì)纖維化；免疫組化和免疫印跡法分別檢測 TGF-β1、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)、尿8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)排泄率、腎LC3-II的表達(dá)。
　　結(jié)

3、果：
　?、倩緟?shù)檢測：大鼠腎毒性組與正常對照組比較，血糖曲線下面積升高，血糖和糖化血紅蛋白升高、血胰島素水平下降，L治療組與腎毒性組比較，血糖曲線下面積降低，血糖和糖化血紅蛋白降低、血胰島素水平上升(P<0.05)。與對照組比較，腎毒性組小鼠體重下降(WG:76±3g vs.90±2g,P<0.01)，腎功能降低，表現(xiàn)為Scr和BUN的上升；L治療明顯改善大鼠的體重增加和腎功能。
　?、谀I臟病理檢測：與對照組相比，腎毒性

4、組皮質(zhì)表現(xiàn)為特征性的腎小管間質(zhì)帶狀纖維化[(34.1±3.2)％/0.5mm2 vs.(0±0)%/0.5mm2,P<0.01]，L治療明顯減少腎小管間質(zhì)纖維化程度[(28.7±2.5)%/0.5mm2 vs.(34.1±3.2)%/0.5mm2,P<0.05]，L在高劑量下進(jìn)一步減少腎小管間質(zhì)纖維化程度[(23.2±3.6)%/0.5mm2 vs.(28.7±2.5)%/0.5mm2,P<0.05]。
　?、跜sA治療上調(diào)TGF

5、-β1的表達(dá)[(46.0±2.3)%/0.5mm2 vs.(17.1±0.5)%/0.5mm2,P<0.01]，而L治療保護(hù)明顯下調(diào)TGF-β1的表達(dá)[(40.0±1.4)%/0.5mm2 vs.(46.0±2.3)%/0.5mm2;P<0.05]，L在高劑量下進(jìn)一步下調(diào)TGF-β1的表達(dá)[(30.2±3.0)%/0.5mm2 vs.(40.0±1.4)%/0.5mm2;P<0.05]。
　　④免疫組化結(jié)果顯示，毒性組大鼠腎中8-

6、OHdG蛋白的表達(dá)活性明顯增加，L治療抑制8-OHdG蛋白的表達(dá)。與此相一致，ELISA結(jié)果表明毒性組大鼠尿8-OHdG的排泄增加[(241.0±37.2)ng/day.vs.(130.7±17.0)ng/day,P<0.01]，L治療明顯減少尿8-OHdG的排泄[(208.3±19.7)ng/day. vs.(241.0±37.2)ng/day,P<0.05]，L在高劑量下進(jìn)一步減少尿8-OHdG的排泄[(177.2±12.7)ng/

7、day. vs.(208.3±19.7)ng/day,P<0.05]。
　?、菝庖哂≯E法檢測各組胰腺和腎臟LC3的表達(dá)。CsA明顯上調(diào)胰腺[(190±19)%vs.(100±13)%,P<0.01]和腎臟[(183±11)%vs.(100±6)%,P<0.01]LC3蛋白的表達(dá)，L在低劑量時(shí)對LC3的表達(dá)無影響[胰腺:(171±22)% vs.(190±19)%,P>0.05；腎臟:(186±8)%vs.(183±11)%,P>0