在卡鉑所致的大鼠急性腎損傷中腎損傷分子-1的表達(dá)及鹽酸乙酰左卡尼汀對(duì)其保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：鹽酸乙酰左卡尼汀作為機(jī)體自身可以分泌的物質(zhì)它有強(qiáng)大的抗氧化損傷能力，而卡鉑腎損傷的一個(gè)重要的機(jī)制便是通過(guò)氧化損傷導(dǎo)致腎小管細(xì)胞受損，但目前國(guó)內(nèi)對(duì)這方面研究較少，本實(shí)驗(yàn)將通過(guò)建立卡鉑導(dǎo)致腎損傷的動(dòng)物模型，通過(guò)建立正常、腎損傷及藥物治療對(duì)照組模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，從而判斷鹽酸乙酰左卡尼汀對(duì)卡鉑腎毒性的臨床應(yīng)用價(jià)值及腎損傷分子-1在診斷急性腎損傷過(guò)程中的意義。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)將選用65只健康雄性 SD（Sprague-Dawle）大

2、鼠并進(jìn)行隨機(jī)分組，分為三個(gè)組：第一組正常對(duì)照組（CN）5只、第二組卡鉑模型組（CP）30只、第三組鹽酸乙酰左卡尼汀干預(yù)組（LC+CP）30只。正常對(duì)照組：每日給予腹腔注射生理鹽水5ml/kg，連續(xù)4d，第5d時(shí)處死；卡鉑模型組：每日給予腹腔注射生理鹽水5ml/kg，連續(xù)4d，第5d將卡鉑干粉用生理鹽水溶解為1mg/ml的液體，按照7mg/kg進(jìn)行腹腔注射，注射卡鉑溶液的雄性 SD大鼠分別在第6h、12h、24h、48h、3d、5d時(shí)，隨

3、機(jī)抽取5只大鼠處死；鹽酸乙酰左卡尼汀干預(yù)組：將鹽酸乙酰左卡尼汀干粉用生理鹽水溶解為100mg/ml的液體，按照500mg/kg進(jìn)行腹腔注射，連用4d，第5d分別將卡鉑干粉用生理鹽水溶解為1mg/ml的液體，按照7mg/kg進(jìn)行腹腔注射，用藥后的雄性SD大鼠分別在第6h、12h、24h、48h、3d、5d后，隨機(jī)抽取5只大鼠處死。所有大鼠處死時(shí)均做膀胱穿刺取尿留取尿液標(biāo)本，測(cè)定尿液腎損傷分子-1，同時(shí)留取靜脈血標(biāo)本測(cè)定血清肌酐、血清腎損傷

4、分子-1；同時(shí)取腎組織勻漿測(cè)定腎組織腎損傷分子-1及提取RNA做實(shí)時(shí)熒光定量PCR來(lái)測(cè)定 Kim-1表達(dá)；取腎組織應(yīng)用10％福爾馬林固定，并行石蠟包埋做 HE染色，以觀察腎臟病理學(xué)改變。
　　結(jié)果：與正常對(duì)照組相比卡鉑模型組的大鼠肌酐在1d時(shí)開始明顯升高（P<0.05），3d時(shí)增高速度減緩；同時(shí)卡鉑模型組大鼠的尿及腎臟組織的腎損傷分子-1的含量較正常對(duì)照組在損傷6h便明顯升高（P<0.05），早于腎小管上皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化時(shí)間，并

5、且隨病程延長(zhǎng)腎小管上皮細(xì)胞損傷加重濃度逐漸升高；實(shí)時(shí)定量 PCR顯示 Kim-1基因的表達(dá)量較正常組明顯明顯上調(diào)，在腎小管細(xì)胞出現(xiàn)自我修復(fù)時(shí)仍維持在較高的表達(dá)水平，可能與促進(jìn)腎小管細(xì)胞的修復(fù)有關(guān)；HE染色也表現(xiàn)出明顯腎損傷，3d時(shí)損傷達(dá)到高峰，5d時(shí)可見腎小管上皮細(xì)胞的自我修復(fù)；鹽酸乙酰左卡尼汀干預(yù)組的大鼠較卡鉑模型組肌酐升高緩慢（P<0.05），病理提示同時(shí)間段腎損傷較其減輕，尿及腎臟組織的腎損傷分子-1的含量也明顯降低（P<0.05

6、），實(shí)時(shí)定量 PCR提示較同時(shí)間段卡鉑模型組 Kim-1基因表達(dá)量下調(diào)。在卡鉑導(dǎo)致的腎損傷大鼠中血清腎損傷分子-1測(cè)定無(wú)明顯升高，同時(shí)經(jīng)過(guò)分析提示各組及各個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠之間無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：1、卡鉑可引起大鼠以腎小管損害為主的急性腎損傷，并且隨時(shí)間延長(zhǎng)其損傷呈加重趨勢(shì)；2、在卡鉑導(dǎo)致的大鼠急性腎損傷中，3d為重要的轉(zhuǎn)折點(diǎn)，在此時(shí)間點(diǎn)腎組織損傷達(dá)到高峰；3、卡鉑導(dǎo)致的急性腎損傷過(guò)程中，腎損傷分子-1表達(dá)在6小時(shí)便