特布他林對流感病毒感染引起的小鼠肺損傷修復(fù)的促進作用.pdf

1、流行性感冒（流感）是由流感病毒感染引起的嚴重危害人類身體健康的急性呼吸道傳染病?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實，流感病毒的致命后果是宿主肺水腫和廣泛的炎性滲出為特點的免疫病理損傷。而有實驗研究表明，水通道蛋白5（aquaporin5，AQP5）在肺部表達或功能的改變，可改變肺水腫時機體清除過多水腫液的能力，從而改變肺泡及肺間質(zhì)性水腫的程度。水通道蛋白是一族存在于多種組織細胞膜上的對水有特異通透性的膜蛋白，其亞型AQP5主要存在于Ⅰ型肺泡上皮細胞，構(gòu)成

2、肺臟血氣屏障的水分子通道，是肺臟調(diào)節(jié)水轉(zhuǎn)運的分子基礎(chǔ)。
　　本實驗經(jīng)鼻滴入甲型流感病毒小鼠肺適應(yīng)株A/PR/8/34以建立小鼠病毒性肺炎模型，并用AQP5激動劑特布他林(Terbutaline)處理，同時設(shè)立模型對照組及正常對照組。于感染后第5日，摘取體內(nèi)肺臟，稱重，計算肺指數(shù)和肺指數(shù)抑制率;記錄肺組織病變程度，并用10％多聚甲醛固定，自動石蠟機包埋，使用常規(guī)方法切片，蘇木精—伊紅(HE)染色法染色，光學(xué)顯微鏡下觀察小鼠肺組織病理

3、形態(tài)學(xué)變化;采用血凝滴度法測定流感感染小鼠肺組織的病毒載量;采用ELISA法，檢測流感病毒感染小鼠肺組織灌洗液中粘蛋白MUC5AC和MUC5B的含量;采用免疫組織化學(xué)染色法觀察小鼠肺組織中AQP5和MUC5AC蛋白的表達情況。
　　結(jié)果顯示:與正常對照組相比，病毒模型組小鼠的肺組織具有明顯的病毒性肺炎癥狀，肺體積增大，多見2個肺葉以上成片的病變區(qū)，呈現(xiàn)暗紅色外觀，光鏡下可見重度間質(zhì)性肺炎病變，肺泡間隔增厚，肺泡壁和細支氣管壁周圍出

4、現(xiàn)大量單個核細胞浸潤，形成病變區(qū);HE染色病理評分顯示，病毒模型組小鼠的肺組織病理評分值(4.2±0.8)具有顯著差異(P＜0.01);流感病毒感染小鼠模型組肺指數(shù)最大，具有顯著差異(P＜0.01);病毒血凝滴度明顯上升，血凝程度具有顯著差異(P＜0.01);肺組織MUC5AC含量明顯增加，具有顯著差異(P＜0.01)，免疫組化結(jié)果顯示肺組織細胞漿內(nèi)呈彌漫性黃色，強陽性表達;但各組小鼠肺灌洗液中MUC5B含量無顯著差異(P＞0.05);

5、免疫組化實驗顯示肺組織AQP5蛋白表達明顯降低，未見明顯陽性表達。
　　與流感病毒組模型比較，特布他林處理后，小鼠肺部的病變均有不同程度的減輕，光鏡下可見肺泡間隔略有增厚，僅有輕度的間質(zhì)性肺炎表現(xiàn)，肺泡壁和細支氣管壁單個核細胞浸潤較少，腔內(nèi)無滲出，病變明顯減輕;HE染色病理評分值(1.9±0.6)與模型對照組相比有顯著差異(P＜0.01);特布他林處理小鼠的肺指數(shù)顯著降低(P＜0.01)，肺指數(shù)抑制率顯著升高;特布他林處理后，小鼠