SELDI-TOF-MS技術(shù)對大腸癌裸鼠動物模型早期蛋白組學(xué)研究.pdf

1、 中圖分類號： 中圖分類號：R89；R36；R39 碩 士 學(xué) 位 論 文 SELDI SELDI-TOF TOF-MS MS 技術(shù)對大腸癌裸鼠動物模型 技術(shù)對大腸癌裸鼠動物模型 早期蛋白組學(xué)研究 早期蛋白組學(xué)研究 院（系） 、所 院（系） 、所 臨 床 醫(yī) 學(xué) 院 研究生姓名 研究生姓名 李 亞 峰 學(xué)科、專 學(xué)科、專業(yè) 內(nèi) 科 學(xué) 導(dǎo) 師 姓 導(dǎo) 師 姓 名 陶

2、華林 陶華林 教 授 二Ο一Ο年四月 Ο年四月 SELDI-TOF-MS 技術(shù)對大腸癌裸鼠動物模型 技術(shù)對大腸癌裸鼠動物模型 早期蛋白組學(xué)研究 早期蛋白組學(xué)研究 中 文 摘 要 目的 目的：利用結(jié)腸癌細(xì)胞懸液皮下接種 balb/c 裸小鼠，構(gòu)建 HCT-116 人結(jié)腸癌裸鼠動物模型，觀測時(shí)間與移植瘤大小變化，檢測分析接種后不同時(shí)期裸鼠體內(nèi)微量蛋白譜的變化，尋找差異蛋白，探索大腸癌的病因和發(fā)病機(jī)制。 方法 方法：1 模型的構(gòu)

3、建：復(fù)蘇培養(yǎng) HCT-116 大腸癌細(xì)胞，收集第 3-5 代對數(shù)生長期細(xì)胞， 將細(xì)胞懸液調(diào)至密度 1×107/ml， 皮下以 0.1ml 接種于 10只 3-4 周齡裸鼠背部皮下,每隔十天測量瘤體大小并記錄.對照組同時(shí)用0.1ml 1640 培養(yǎng)基液接種。實(shí)驗(yàn)組和對照組裸鼠分別在接種后 20d、40d和 60d 取血， 前兩次采用斷尾法取血 0.1ml， 最后一次采用摘眼球取血 05ml后處死裸鼠并剝離瘤體， 測量瘤體體積,剝

4、離的瘤體立即送病理科進(jìn)行病理切片檢查。所取血液標(biāo)本立即 4℃ 3 000 rpm 離心 5 min，將分離的血清分裝 3 管，30 μL/管并進(jìn)行編號，立即凍存于 -80℃ 冰箱中備用。2 蛋白組學(xué)檢測與分析：利用 SELDI-TOF-MS 技術(shù)對裸鼠血清進(jìn)行微量蛋白分析，將獲得的微量蛋白質(zhì)譜圖用 Ciphergen ProteinChip 3.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的校正和分析，采用 Ciphergen Biomaker Wizard 3.