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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文MG132和順鉑對宮頸鱗癌細(xì)胞株HCE1多細(xì)胞球體的抑制作用及其與NFκB、bcl2表達(dá)的關(guān)系姓名:楊紅杰申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:吳宜林20080501碩l:學(xué)位論上中文摘要檢測HCEl單層細(xì)胞及各組藥物干預(yù)后多細(xì)胞球體NFKB(p65)的表達(dá)。(2)免疫組化槍測HCEl單層細(xì)胞及各組藥物干預(yù)后多細(xì)胞球體bcl2的表達(dá)。結(jié)果(一)多細(xì)胞球體模型的建立:1HCEl細(xì)胞生長狀態(tài):顯微鏡下見HCEl細(xì)胞生
2、長狀態(tài)良好,旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)24小時可見細(xì)胞聚集成團(tuán),并隨培養(yǎng)時間的延長,結(jié)構(gòu)更加緊密,直徑逐漸增大。2HCEl多細(xì)胞球體組織學(xué)結(jié)構(gòu):球體貼壁后可見中央?yún)^(qū)壞死核心、球體周圍細(xì)胞生長暈;HE染色下見多細(xì)胞球體核心部位無結(jié)構(gòu)紅染區(qū),周圍細(xì)胞可見核分裂。3HCEl多細(xì)胞球體生長曲線:HCEl多細(xì)胞球體培養(yǎng)至第10天球體生長進(jìn)入平臺期,球體倍增時間為443_047天。(二)臺盼蘭拒染法檢測MGl32和順鉑對HCEl單層細(xì)胞的抑制率:1蛋白酶體抑制劑MG
3、l32濃度分別為:15、2O、25、50、100、200umol/l干預(yù)HCEl單層細(xì)胞48h,細(xì)胞抑制率分別為589_048%,1000033%,2033121%,5000176%,6167500%,7856416%ICl0值為2Oumol/L。2順鉑濃度分別為:50、100、150m朗干預(yù)HCEl單層細(xì)胞48h,細(xì)胞抑制率分別為3922620%,8034153%,9389347%;IC50值61mg/L。(三)藥物干預(yù)及相關(guān)實驗:1
4、各組藥物干預(yù)HCEl單層細(xì)胞及多細(xì)胞球體48小時:(1)形態(tài)學(xué)觀察:①對照組:HCEl單層細(xì)胞生長狀態(tài)良好,胞漿透亮,細(xì)胞伸展為不規(guī)則對角形;HCEl多細(xì)胞球體生長狀態(tài)良好,細(xì)胞呈圓形、細(xì)胞間連接緊密,胞漿透亮。(g)MGl32組:HCEl單層細(xì)胞中少數(shù)細(xì)胞胞膜皺縮、變圓并脫壁,貼壁細(xì)胞間隙增寬;HCEl多細(xì)胞球體開始解聚,散落細(xì)胞增加,細(xì)胞皺縮,邊緣折光增強(qiáng)。③順鉑組:HCEl單層細(xì)胞中角多量細(xì)胞胞膜皺縮、變圓并脫壁,貼壁細(xì)胞進(jìn)一步減
5、少;HCEl多細(xì)胞球體結(jié)構(gòu)仍緊密,未見明顯解聚現(xiàn)象。④MGl32]II頁鉑組:HCEl單層細(xì)胞中幾乎未見正常貼壁細(xì)胞,絕大多數(shù)細(xì)胞脫壁、漂??;HCEl多細(xì)胞球體明顯解聚,見大量散落細(xì)胞,邊緣折光增強(qiáng)。(2)各組藥物干預(yù)后HCEl單層細(xì)胞及多細(xì)胞球體抑制率:①對照組:HCEl單層細(xì)胞抑制率及多細(xì)胞球體抑制率均為100000%。(②MGl32組:HCEl單層細(xì)胞及多細(xì)胞球體抑制率分別為1167234%、1078117%,(P005)。③順鉑
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