SHE78-7對宮頸癌細胞株HCE1多細胞球體5-FU敏感性及P27表達的影響.pdf

1、目的：探討E-鈣粘蛋白單克隆抗體SHE78-7能否增強宮頸癌細胞株HCE1多細胞球體對5-FU敏感性及對P27表達的影響
　　 方法：
　　 （一）運用液體重疊法和旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)法培養(yǎng)宮頸鱗癌HCE1多細胞球體。
　　 （二）WST-1法檢測SHE78-7干預(yù)細胞黏附前后，不同濃度梯度的5-FU對HCE1多細胞球體的增殖抑制作用，以單層細胞作為對照，分別計算半數(shù)抑制率濃度IC50值，多細胞耐藥指數(shù)MCRI，并繪制濃度—

2、抑制率曲線。
　　 （三）免疫細胞化學法檢測SHE78-7干預(yù)前后HCE1多細胞球體P27的表達，以單層細胞作為對照。
　　 （四）流式細胞儀檢測SHE78-7干預(yù)前后HCE1多細胞球體細胞周期分布變化，以單層細胞作為對照。
　　 結(jié)果：
　　 （一）多細胞球體的培養(yǎng)：HCE1細胞生長狀態(tài)：顯微鏡下見HCE1細胞生長狀態(tài)良好，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)24小時可見細胞聚集成團，并隨培養(yǎng)時間的延長，結(jié)構(gòu)更加緊密，直徑逐漸增大

3、，第4天可出現(xiàn)中心壞死。
　　 （二）WST-1法檢測單克隆抗體SHE78-7干預(yù)細胞黏附前后，不同濃度梯度的5-FU對HCE1多細胞球體的增殖抑制作用，以單層細胞作為對照：(1)SHE78-7干預(yù)細胞黏附前：5-FU作用于單層細胞的IC502D：14.44ug/ml，多細胞球體的IC503D：26.56ug/ml，MCRI：1.84。(2)SHE78-7干預(yù)細胞黏附后：5-FU作用于單層細胞的IC502D’：12.12ug/m

4、l，多細胞球體的IC503D’：14.20ug/ml，MCRI’：1.17。
　　 濃度—抑制率曲線顯示：5-FU對HCE1多細胞球體的增殖抑制作用呈劑量依賴關(guān)系，SHE78-7干預(yù)后，5-FU的IC50值及MCRI值均明顯下降。
　　 （三）免疫細胞化學法檢測SHE78-7干預(yù)HCE1多細胞球體前后P27的表達：SHE78-7干預(yù)HCE1細胞前后：多細胞球體P27高表達率分別為53.3％、26.7％，兩者差異有顯著性(

5、P＝0.04)；而單層細胞P27在干預(yù)前后均低表達，兩者差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 （四）流式細胞學檢測SHE78-7干預(yù)HCE1多細胞球體前后細胞周期分布變化：
　　 ①SHE78-7干預(yù)前：HCE1多細胞球體與單層細胞G0/G1期細胞百分率分別為66.76±3.68、32.96±3.21，差異具顯著性(P＜0.05)：S期細胞百分率分別為16.42±1.60、46.54±4.52，差異具顯著性(P＜0.05

6、)。
　　 ②SHE78-7干預(yù)后：
　　 單細胞組 G0/G1期細胞百分率從干預(yù)前32.96±3.21下降至11.12±5.12，差異具顯著性(P＜0.05)；S期細胞百分率從干預(yù)前46.54±4.52升高至53.06±6.10，差異無顯著性(P＝0.21)
　　 多細胞球體組 G0/G1期細胞百分率從干預(yù)前66.76±3.68下降至34.25±2.36，差異具顯著性(P＜0.05)；S期細胞百分率從干預(yù)前16