非綜合征型白化病家系基因分析及產(chǎn)前基因診斷的研究.pdf

1、目的：①了解中國人群非綜合征型白化病致病基因的主要基因類型、突變方式和突變位點的分布特征，探討白化病的臨床表型與基因類型的相關性，建立適合我國白化病患者的基因診斷方法和產(chǎn)前基因診斷方法。②探討胎兒鏡和基因檢測兩種產(chǎn)前診斷方法在臨床上的應用價值，建立適合我國白化病人群的產(chǎn)前診斷方法。 方法：①收集26個無血緣關系白化病家系DNA標本共84份(其中2個家系僅收集到親代DNA標本)，包括夫婦雙方和(或)先證者外周血DNA標本64份、胎

2、兒羊水細胞DNA標本19份、絨毛DNA標本1份。通過先證者的I臨床表型將26個家系初分為OCA1A型19個，OCA2型7個。針對可能的基因類型進行家系各成員DNA標本PCR-SSCP檢測，結合直接測序法檢測家系OCA1、OCA2、OCA3和OCA4四種非綜合征型白化病突變基因。分析其中25個家系白化病突變基因與臨床表型的相關性。分析其中23個家系親代與子代突變基因的遺傳方式及產(chǎn)前基因診斷的可行性。②對要求胎兒鏡檢查的家系中的14個隨訪至

3、妊娠結局，以胎兒或新生兒表型是否正常為診斷金標準，比較胎兒鏡與產(chǎn)前基因檢測兩種診斷方法的優(yōu)缺點。 結果：①26個家系52個預期致病等位基因中，47個等位基因檢出致病性突變或新突變，突變的檢出率為90％(47/52)。其中25個家系被分別確診為19個OCA1，4個OCA4，2個OCA2。另外1個家系四種OCA基因類型均未檢測到突變。19個OCA1共檢測到23種突變，15種是已報道的致病性突變，8種是可疑新突變(C100P，C100

4、T,R212T,T235G,R299C，G506L，1348insGG,IVS2-17insAC)，有待進一步確認；錯義突變(15/23)是主要的突變方式；插入突變P930insC(7/38)和錯義突變R299H(6/38)出現(xiàn)頻率較高。4個OCA4檢測到6種突變，5種是可疑新突變(G110A，L151S，A160G，Y266X，1-6delgtggccatgg)，其中錯義突變4種，無義突變1種，缺失突變1種。2個OCA2檢測到3種錯義

5、突變，均為可疑新突變(T450L，A455G,L727P)。臨床上初分為OCA1A白化病患者，其表型與基因類型的符合率為84％；初分為OCA2患者，其表型與基因類型的符合率僅為29％；OCA1B、OCA2、OCA4三種基因型的臨床表型間相互交叉。通過家系分析表明，22個家系44個突變等位基因均以隱性遺傳的方式傳給子代，符合孟德爾遺傳規(guī)律。1個家系胎兒攜帶突變基因與雜合子父親一致，沒有攜帶母方的白化病基因，但生后表型為“白化病兒”，與隱性

6、遺傳規(guī)律似不相符，其原因有待進一步探討。②14個家系中胎兒鏡檢查的診斷符合率92％，產(chǎn)前基因檢測的診斷符合率為100％，產(chǎn)前基因診斷的準確性更高。 結論：①26個白化病家系突變基因分析結果提示，OCA1可能是我國主要的基因類型，其中插入突變P930insC和錯義突變R299H可能是中國人群的主要突變方式。PCR-SSCP結合直接測序法可以檢測出90％以上的基因突變，是適合我國白化病患者的基因診斷方法。②在分析家系白化病突變基因的