人臍血CD34+造血細(xì)胞體外誘導(dǎo)成DC2的方法及CD40信號(hào)在DC2分化發(fā)育中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為進(jìn)一步研究DC2的生物學(xué)活性及其在免疫相關(guān)性疾病的臨床治療方面提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),本研究旨在建立體外采用細(xì)胞因子從人臍血中CD34+造血干/祖細(xì)胞誘導(dǎo)DC2的方法及激發(fā)型鼠抗人CD40單抗在DC2分化和成熟中作用?! ”狙芯渴紫炔捎妹庖叽胖閺娜四氀蟹蛛x出CD34+造血干/祖細(xì)胞,加入細(xì)胞因子rhIL-3(10ng/ml)、rhFlt-3L(FL,100ng/ml)和rhGM-CSF(100ng/ml)在體外誘導(dǎo)DC2,繼而在培養(yǎng)的第13

2、天,將培養(yǎng)細(xì)胞分為兩組并分別加入rhIL-3(10ng/ml)和抗CD40mAb(5ug/ml)或rhIL-3(10ng/ml)和TNFα(10ng/ml)進(jìn)一步誘導(dǎo)DC2的成熟,2天后通過流式細(xì)胞儀分別分析DC2表面分化抗原CD123、HLA-DR、CD83、CD86、CD80的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示兩組培養(yǎng)細(xì)胞中Lineage(CD3、CD14、CD16、CD19、CD20、CD56)陰性的細(xì)胞含量分別占81.78%、84.73%。rh

3、IL-3(10ng/ml)、抗CD40mAb激活組的DC2表面抗原CD123、HLA-DR、CD83、CD86、CD80的表達(dá)率分別為24.54%、88.74%、37.40%、32.79%、99.13%;而rhIL-3(10ng/ml)和TNFα(10ng/ml)激活組的DC2表面抗原CD123、HLA-DR、CD83、CD86、CD80表達(dá)率分別為21.01%、78.85%?! ∮纱丝梢姳緦?shí)驗(yàn)建立的方法可以有效地從臍血CD34+細(xì)胞

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