奶牛乳腺上皮細(xì)胞在炎性狀態(tài)下對(duì)基質(zhì)成纖維細(xì)胞生物學(xué)特性及功能的影響.pdf

1、奶牛乳腺炎是由于乳房損傷或病原微生物入侵所引起的機(jī)體代謝和生理狀態(tài)改變的炎癥反應(yīng)，是嚴(yán)重影響奶牛業(yè)發(fā)展的最常見(jiàn)的疾病之一。在奶牛乳腺發(fā)生炎癥的早期，乳腺導(dǎo)管中的病原菌會(huì)首先侵入腺泡表層的乳腺上皮細(xì)胞，進(jìn)而影響乳腺上皮細(xì)胞的生理特性，導(dǎo)致上皮細(xì)胞的炎性細(xì)胞因子異常分泌。乳腺上皮細(xì)胞異常分泌的炎性細(xì)胞因子通過(guò)內(nèi)環(huán)境影響周圍組織中基質(zhì)細(xì)胞的生理特性，使基質(zhì)細(xì)胞初步表現(xiàn)出炎癥反應(yīng)特征。成纖維細(xì)胞是構(gòu)成乳腺組織重要的基質(zhì)細(xì)胞，其生長(zhǎng)狀態(tài)的改變會(huì)直

2、接影響乳腺組織正常的結(jié)構(gòu)和功能，因此研究奶牛乳腺上皮細(xì)胞在炎性狀態(tài)下對(duì)基質(zhì)成纖維細(xì)胞生物特性和功能的功能影響對(duì)于奶牛乳腺炎的防治具有重要的意義。
　　金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是引起奶牛乳腺炎主要的兩種細(xì)菌，脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)和脂磷壁酸(lipoteichoic acid，LTA)分別是這兩種導(dǎo)致奶牛乳腺炎的細(xì)菌主要毒力成分。本試驗(yàn)以荷斯坦奶牛乳腺組織分離的原代乳腺上皮細(xì)胞作為研究對(duì)象，首先利用

3、LPS和LTA對(duì)乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行炎癥誘導(dǎo)，確定了LPS和LTA炎癥誘導(dǎo)的最適濃度和最適時(shí)間，建立了體外誘導(dǎo)的炎性奶牛乳腺上皮細(xì)胞模型;然后通過(guò)體外間接共培養(yǎng)模式，以LPS和LTA體外誘導(dǎo)的炎性乳腺上皮細(xì)胞與正?；|(zhì)成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)的方法模擬炎性上皮細(xì)胞影響成纖維細(xì)胞過(guò)程，研究炎性乳腺上皮細(xì)胞對(duì)基質(zhì)成纖維細(xì)胞活性、增殖、遷移、凋亡、炎性細(xì)胞因子分泌等生物學(xué)特性的影響，同時(shí)對(duì)導(dǎo)致這些特性發(fā)生變化的分子機(jī)制進(jìn)行探究。結(jié)果表明，LPS和LTA誘

4、導(dǎo)的炎性上皮細(xì)胞均可促進(jìn)了基質(zhì)成纖維細(xì)胞的激活，通過(guò)MAPK信號(hào)通路抑制成纖維細(xì)胞的增殖，通過(guò)WNT/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)了成纖維細(xì)胞的遷移、同時(shí)增強(qiáng)成纖維細(xì)胞對(duì)TNF-α，CCL5，CXCL2，IL6，IL8等炎性相關(guān)因子的表達(dá)和分泌，誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白Fibronection和CollagenⅠ的沉積。這些結(jié)果表明奶牛乳腺上皮細(xì)胞在炎性狀態(tài)下，通過(guò)內(nèi)環(huán)境對(duì)基質(zhì)成纖維細(xì)胞生炎癥響應(yīng)。這一結(jié)果為進(jìn)一步研究乳腺基質(zhì)成纖維細(xì)胞在奶