校園潛伏結(jié)核感染的篩查.pdf

1、目的: 用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)（Enzyme-linked immunospot，ELISPOT）和結(jié)核菌素皮膚實(shí)驗(yàn)（Tuberculin Skin Test TST）兩種不同的實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)的大學(xué)生潛伏結(jié)核感染（latent tuberculosis infection，LTBI）率；比較2種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果，為將來是否可以以ELISPOT實(shí)驗(yàn)，或者兩種實(shí)驗(yàn)相結(jié)合為基礎(chǔ)進(jìn)行大學(xué)生的LTBI的篩查和預(yù)防性治療提供初步的理論依據(jù)；如果篩查中

2、出現(xiàn)菌陽(yáng)的結(jié)核病患者，則對(duì)獲得的菌株進(jìn)行基于結(jié)核分枝桿菌散在分布重復(fù)單位（Mycobacterial interpersed repetitive units，MIRU）的基因分型，擬從長(zhǎng)期隨訪過程中獲得多個(gè)菌株，從而從分子流行病學(xué)與傳統(tǒng)流行病學(xué)相結(jié)合的角度分析大學(xué)生中結(jié)核病流行傳播情況，以便更好的控制校園結(jié)核病的發(fā)生。 方法: 運(yùn)用兩種細(xì)胞免疫試驗(yàn)方法-ELISPOT和TST對(duì)大學(xué)生以及作為對(duì)照的校工群體進(jìn)行LTBI者

3、的篩查。對(duì)于胸部透視異常者，進(jìn)行痰分枝桿菌的培養(yǎng)，對(duì)于獲得的菌株進(jìn)行MIRU基因分型。 結(jié)果: 1．學(xué)生群體中TST實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲得率為88．94％（796/895），ELISPOT確定結(jié)果獲得率為94．75％（848/895）；校工群體中TST實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲得率為91．36％（148/162）；ELISPOT確定結(jié)果獲得率為95．68％，在學(xué)生和校工2個(gè)群體中，ELISPOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果的獲得率均高TST試驗(yàn)，特別是在學(xué)生群體中更

4、有顯著性差異（P<0．01）。 2．學(xué)生群體中TST實(shí)驗(yàn)總的陽(yáng)性率為21．80％（167/766），ELISPOT實(shí)驗(yàn)總的陽(yáng)性率為13．84％（106/766）；校工群體中TST實(shí)驗(yàn)總的陽(yáng)性率為22．70％（32/141），ELISPOT實(shí)驗(yàn)總的陽(yáng)性率為12．77％（18/141），無論是在學(xué)生還是校工群體，TST實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性率均大于ELISPOT實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P學(xué)生<0．01，P校工<0．05）。 3．

5、2個(gè)群體中，通過卡方檢驗(yàn)ELISPOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果均不受BCG接種的影響（P>0．05），而TST實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著受到BCG接種影響（P<0．05）；2種實(shí)驗(yàn)的符合情況采用McNemar檢驗(yàn)，學(xué)生群體中Kappa=0．123；校工群體中Kappa=-0．004，符合性較差。 4．學(xué)生群體的ELISPOT實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果中，對(duì)應(yīng)的TST實(shí)驗(yàn)硬結(jié)直徑的中位數(shù)是11．5mm，；ELISPOT實(shí)驗(yàn)陰性結(jié)果中，對(duì)應(yīng)的TST實(shí)驗(yàn)硬結(jié)直徑的中位數(shù)是8．7

6、5mm，2組硬結(jié)直徑的比較有顯著性差異（P<0．01）；校工群體中2組硬結(jié)直徑的比較沒有顯著性差異（P>0．05）。 5．學(xué)生群體中， BCG接種組的2種實(shí)驗(yàn)不相符的結(jié)果中，ELISPOT（-）/TST（+）人數(shù)所占的比例大于ELISPOT（+）/TST（-）人數(shù)的2倍，而在BCG未接種組，ELISPOT（+）/TST（-）人數(shù)所占的比例大于ELISPOT（-）/TST（+）結(jié)果的2倍，且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（PBCG接種<0．0

7、1；PBCG未接種<0．05），BCG接種與未接種組間TST實(shí)驗(yàn)硬結(jié)直徑的比較也有顯著性差異（P<0．01）；在校工群體沒有得到以上結(jié)果。 6．對(duì)于學(xué)生群體，在ELISPOT（+）、ELISPOT（+）/TST（+）和ELISPOT（+）/TST（-）3組結(jié)果中，CFP-10抗原孔產(chǎn)生的T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)的中位數(shù)均為32/106PBMC，而ESAT-6抗原孔產(chǎn)生的T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)的中位數(shù)分別為24/106PBMC、32/106PBMC和2

8、0/106PBMC，除了ELISPOT（+）/TST（+）組中兩種抗原孔產(chǎn)生的斑點(diǎn)中位數(shù)相等外，其余兩組CFP-10抗原孔產(chǎn)生的斑點(diǎn)數(shù)均多于ESAT-6抗原孔且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）；ELISPOT（+）/TST（+）組中處于臨界值的反應(yīng)有6個(gè)，占16．22％，ELISPOT（+）/TST（-）處于臨界值的反應(yīng)有10個(gè)，占14．49％。106個(gè)ELISPOT陽(yáng)性結(jié)果中，對(duì)CFP-10抗原反應(yīng)的總的陽(yáng)性率為90．57％，ESA

9、T-6抗原總的陽(yáng)性率為67．92％；2個(gè)率的比較有顯著性差異（P<0．01）；校工群體中，對(duì)于以上3種結(jié)果ESAT-6抗原孔產(chǎn)生的T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)的中位數(shù)分別為24/106PBMC、30/106PBMC和24/106PBMC，CFP-10抗原孔產(chǎn)生的斑點(diǎn)中位數(shù)34/106PBMC、16/106PBMC和38/106PBMC，ELISPOT（+）/TST（+）組中處于臨界值的反應(yīng)有2個(gè)，占50％，ELISPOT（+）/TST（-）結(jié)果組中，沒

10、有處于臨界值的反應(yīng)，CFP-10抗原孔產(chǎn)生的斑點(diǎn)數(shù)多于ESAT-6抗原孔且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），CFP-10抗原總的陽(yáng)性率為72．22％； ESAT-6抗原總的陽(yáng)性率為61．11％；2個(gè)率的比較沒有顯著性差異（P>0．05）。 7．篩查中5人胸部透視異常，后經(jīng)進(jìn)一步檢查確診4人為結(jié)核患者，1人為氣胸。這4名結(jié)核患者包括1人為菌陽(yáng)性肺結(jié)核，2人為菌陰性肺結(jié)核，另外1人為結(jié)核性胸膜炎。利用MIRU分型技術(shù)確定該菌株的基因

11、型為“223325173533”。 結(jié)論: 通過利用ELISPOT和TST實(shí)驗(yàn)對(duì)大學(xué)生進(jìn)行LTBI的篩查，初步掌握了用兩種不同的細(xì)胞免疫方法獲得的LTBI率，用MIRU技術(shù)對(duì)獲得的1株菌株進(jìn)行基因分型，為以后學(xué)校學(xué)生的隨訪、調(diào)查結(jié)核病的傳播奠定了基礎(chǔ)。ELISPOT實(shí)驗(yàn)不受BCG接種的影響，具有較好的特異性；TST實(shí)驗(yàn)受到BCG接種的顯著影響，一方面導(dǎo)致2種實(shí)驗(yàn)較差的符合性，另一方面也說明了目前國(guó)內(nèi)基于TST≥15mm的