應(yīng)用PPO基因診斷骨轉(zhuǎn)移性腺癌的初步臨床研究.pdf

1、目的:通過對多種細(xì)胞遺傳學(xué)異常現(xiàn)象的研究顯示,1號染色體和/或1號染色體末端lp36區(qū)存在著雜合性缺失和染色體獲得的現(xiàn)象,這些結(jié)果表明在此區(qū)可能存在重要的抑癌基因或癌基因。我們在完成人類lp35-lp36的基因圖譜描繪之后,再利用克隆篩選技術(shù),在lp36區(qū)克隆產(chǎn)生了一個新的癌基因,編號為KIA0090,我們把該基因命名為PPO(Phosphorylation and Proliferation Oncogene)。我們研究發(fā)現(xiàn),該基因在

2、人類多種癌組織中都有相應(yīng)的過表達(dá),經(jīng)過基因重組后,在細(xì)胞水平和活體水平證實了與細(xì)胞的增殖和磷酸化有關(guān)。通過對大量腫瘤組織的免疫組化篩選研究,發(fā)現(xiàn)PPO基因在間葉組織來源的腫瘤中不表達(dá),在上皮組織來源的腫瘤中有過表達(dá),關(guān)系密切。我們證實了PPO基因與腺癌有密切相關(guān)性,并制作了PPO基因的單克隆抗體,又進(jìn)一步證實了PPO抗體是一種特異性抗體,現(xiàn)在我們提取出腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的淋巴細(xì)胞,用PPO抗體通過Western blotting法驗證出與腺

3、癌相關(guān)的PPO基因產(chǎn)物,證實了腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血液中存在PPO基因產(chǎn)物,利用某種方法從血液中檢測到這種產(chǎn)物及存在的量,就能在臨床上早期的診斷腺癌及其轉(zhuǎn)移,從而為腺癌的臨床診斷提供有力支持,以進(jìn)一步指導(dǎo)臨床治療。
　　 方法:標(biāo)本均取自河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院經(jīng)病理證實為腺癌骨轉(zhuǎn)移的患者。標(biāo)本收集后提取淋巴細(xì)胞,然后用Western blotting等方法制檢測。標(biāo)本包含甲狀腺癌骨轉(zhuǎn)移、肺腺癌骨轉(zhuǎn)移、乳腺癌骨轉(zhuǎn)移、肝癌骨轉(zhuǎn)移、前列腺癌

4、骨轉(zhuǎn)移等多種腫瘤標(biāo)本。每個研究對象都進(jìn)行淋巴細(xì)胞的提取、Western blotting分析。
　　 結(jié)果:通過以往的研究我們知道PPO基因在腺癌中都有明顯過表達(dá);PPO基因的產(chǎn)物與腺癌的密切相關(guān)性。我們用Western blotting證實了這種結(jié)果,即腺癌骨轉(zhuǎn)移患者的血液中可檢測到PPO基因的產(chǎn)物,PPO基因的產(chǎn)物在腺癌中起著至關(guān)重要的作用。
　　 結(jié)論:我們提取出肺腺癌骨轉(zhuǎn)移和肝癌骨轉(zhuǎn)移患者的淋巴細(xì)胞,用PPO抗體