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文檔簡介
1、牙乳頭間充質(zhì)細胞具有分化為成牙本質(zhì)細胞的能力,是研究牙齒發(fā)育特別是牙本質(zhì)形成的重要模型.為了進一步探討CaB在牙齒發(fā)育和牙髓損傷修復過程中的作用機理,采用細胞培養(yǎng)技術建立人牙乳頭細胞體外礦化模型,研究CaB在礦化過程中合成與調(diào)節(jié),產(chǎn)用激光共聚集顯微鏡觀察牙乳頭細胞分化過程中細胞內(nèi)鈣的變化;利用不同發(fā)育時期人牙胚和離體牙標本,用免疫組化方法研究CaB在人牙齒發(fā)育過程中的分布特征及其功能,以期揭示CaB在牙齒礦化中的作用.1.Calbind
2、in-D28K在人牙胚不同發(fā)育時期分布特征及作用的研究;根據(jù)人牙胚發(fā)育時序,采用免疫組化方法觀察牙胚發(fā)育不同時期CaB的表達情況.2.Calbindin-D28K在人健康和齲壞牙髓組織中分布特征比較研究;采用免疫組化方法觀察了CaB在健康和齲壞人恒牙牙髓中的表達.3.體外培養(yǎng)人牙乳頭細胞礦化模型的建立及其分化表型的表達;采用組織塊法培養(yǎng)了人牙乳頭細胞,ABC法免疫組化鑒定細胞來源于外胚層間葉組織,第三代細胞于礦化液中長期體外培養(yǎng),檢測不
3、同培養(yǎng)時間細胞ALP活性,OC活性,用倒置顯微鏡觀察細胞生長.4.1,25(OH)<,2>D<,3>對人牙乳頭細胞的Calbindin-D28K表達及礦化能力的影響;用10<'-8>mol/L 1,25(OH)<,2>D<,3>處理礦化液長期培養(yǎng)的第28d細胞的24h.5.體外培養(yǎng)牙乳頭細胞不同分化階段胞內(nèi)Ca<'2+>濃度的變化及1,25(OH)<,2>D<,3>的調(diào)節(jié).采用體外培養(yǎng)牙乳頭細胞,利用LSCM觀察牙乳頭細胞在其不同分化和
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