miR-146a在喉癌中的表達及其與BRMS1相關性的研究.pdf

1、[目的]
　　本研究旨在探討miR-146a在喉癌中的表達情況，以及驗證喉癌中BRMS1和miR-146a的表達相關性并闡明其作用機制。
　　[方法]
　　收集廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院2013年12月至2014年12月手術切除的喉癌組織標本，完善病例臨床資料，所有患者在手術前均未經(jīng)歷放療和化療。腫瘤組織取自標本的中央部分，去除表面壞死組織和粘液;癌旁正常組織取自手術切緣（癌旁2cm以上）的邊緣黏膜，去除黏膜下層組織只保留麟狀

2、上皮。
　　提取27例喉癌組織、15例癌旁正常喉粘膜組織中的總RNA，逆轉錄并用實時熒光定量PCR檢測其miR-146a的表達，western blotting檢測喉癌組織及癌旁非腫瘤組織中BRMS1蛋白的表達。siRNA瞬時轉染BRMS1至hep-2細胞，實時熒光定量PCR檢測轉染效率，同時對比轉染前后miR-146a的表達變化情況，CCK8與流式細胞學實驗檢測轉染后喉癌細胞的增殖與凋亡能力變化以及細胞周期阻滯的情況。
　

3、　[結果]
　　1.實時熒光定量PCR(qRT-PCR)結果證實miR-146a在喉癌組織中表達水平與癌旁非腫瘤組織相比明顯升高。
　　2.western bloting結果顯示BRMS1在喉癌組織中呈低表達或不表達。
　　3.Hep-2細胞中BRMS1表達抑制后，miR-146a表達水平升高。
　　4.CCK8及流式細胞學實驗結果顯示喉癌細胞中BRMS1表達抑制后，其增殖和凋亡能力并無改變，但細胞周期出現(xiàn)G2/

4、M期阻滯。
　　[結論]
　　1.miR-146a在喉癌組織中表達水平明顯高于癌旁非腫瘤組織，提示miR-146a可能作為喉癌的促腫瘤因素而參與到喉癌的發(fā)生、發(fā)展中。
　　2.在喉癌不同性別、年齡、TNM分期、原發(fā)部位、是否有吸煙史等不同因素的分組中，miR-146a的表達差異均無統(tǒng)計學意義，提示miR-146a可能與喉癌的臨床病理參數(shù)之間并無相關性，但是也不能完全排除取材例數(shù)有限導致的實驗誤差。
　　3.BRM

5、S1基因在喉癌組織中呈低表達或不表達，提示BRMS1可能作為抑癌基因參與喉癌的發(fā)生、發(fā)展等生物學進程。
　　4.BRMS1的表達抑制后，hep-2細胞的增殖與凋亡率未發(fā)生改變，但是細胞周期出現(xiàn)G2/M期阻滯，提示BRMS1并不影響hep-2細胞的增殖與凋亡，BRMS1的表達異?？赡茉黾恿四承┪粗虻耐蛔冾l率致使腫瘤細胞的侵襲和轉移能力增加。
　　5.在hep-2細胞中抑制BRMS1的表達后，miR-146a表達水平升高，提