新型三嗪類抗球蟲藥沙咪珠利的生殖毒性與致畸毒性的研究.pdf

1、本文進(jìn)行了沙咪珠利的生殖毒性與致畸毒性研究，以期獲得沙咪珠利繁殖毒性相關(guān)的安全評(píng)價(jià)資料，具體內(nèi)容包括以下幾個(gè)方面：
　　1.飼料中沙咪珠利的含量檢測(cè)
　　建立HPLC-UV法測(cè)定飼料中的沙咪珠利含量，以4-硝基鄰甲酚為內(nèi)標(biāo)物，C18柱為分析柱，乙腈-0.2％磷酸水溶液為流動(dòng)相。飼料樣品先后經(jīng)乙腈提取，正己烷除脂，紫外檢測(cè)（波長(zhǎng)251nm）和內(nèi)標(biāo)法定量。方法學(xué)考察結(jié)果表明，該方法特異性、精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性良好，在1～50

2、mg/kg添加范圍具有良好的線性關(guān)系，為沙咪珠利在飼料中的準(zhǔn)確測(cè)定提供了可行的方法。
　　2.生殖毒性試驗(yàn)
　　健康非生產(chǎn)的SPF級(jí)SD大鼠240只，雌雄各半，分為4組，每組雌雄各30只，設(shè)空白對(duì)照組和沙咪珠利試驗(yàn)組（2、8、30 mg/kg飼料），喂養(yǎng)染毒進(jìn)行“兩代一胎”繁殖實(shí)驗(yàn)。對(duì)試驗(yàn)中大鼠體重、飼料攝入量、繁殖指數(shù)等各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并對(duì)大鼠的生殖器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。結(jié)果顯示，給藥組與空白組大鼠的體重與飼料利用

3、率成正相關(guān)，且變化趨勢(shì)一致；大鼠的生殖器官?zèng)]有產(chǎn)生與與藥物相關(guān)的病理性變化。給藥組的各項(xiàng)繁殖指標(biāo)基本與空白組沒(méi)有明顯差異，但有個(gè)別的指標(biāo)如出生存活率，在F1代中略偏低。30 mg/kg劑量組仔鼠的體重明顯偏輕，顯示藥物可能通過(guò)母乳影響仔鼠發(fā)育。
　　3.喂養(yǎng)致畸試驗(yàn)
　　喂養(yǎng)致畸試驗(yàn)與繁殖試驗(yàn)進(jìn)行聯(lián)合,設(shè)定空白對(duì)照組和沙咪珠利試驗(yàn)組（2、8、30 mg/kg飼料），將大鼠按體重隨機(jī)分為4組，每組雌雄各30只。在繁殖試驗(yàn)的F2

4、a哺乳結(jié)束后，讓F1代大鼠繼續(xù)交配，在妊娠第20天時(shí)進(jìn)行剖腹檢查，對(duì)F2b代進(jìn)行致畸觀察。試驗(yàn)結(jié)果顯示沙咪珠利30 mg/kg飼料添加組胎鼠的平均仔重明顯低于空白對(duì)照組，但其他指標(biāo)與空白對(duì)照組均無(wú)顯著差異。各組均未出現(xiàn)與藥物相關(guān)的骨骼和內(nèi)臟畸形，顯示藥物對(duì)胎兒發(fā)育沒(méi)有明顯影響。
　　4.大鼠血漿中的藥物濃度測(cè)定
　　建立了UPLC-MS檢測(cè)法，測(cè)定大鼠血漿中沙咪珠利的濃度。樣品用乙腈提取，經(jīng)BEH C18柱分離，以乙腈-0.

5、1%甲酸水溶液為流動(dòng)相。待測(cè)物通過(guò)電噴霧離子源的負(fù)離子模式下的選擇離子監(jiān)測(cè)方式進(jìn)行檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量，內(nèi)標(biāo)物為4-硝基鄰甲酚。方法學(xué)考察結(jié)果顯示，該方法特異性、準(zhǔn)確度、精密度及穩(wěn)定性等都符合要求。在沙咪珠利的30天亞慢毒性試驗(yàn)的第0、1、2、3、28、29、30天及恢復(fù)期的第7天采集樣品；兩代繁殖毒性的實(shí)驗(yàn)中，在每一代的實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)采集母鼠和剛斷奶仔鼠的血漿，在繁殖毒性試驗(yàn)結(jié)束的恢復(fù)期進(jìn)行采集樣品，然后檢測(cè)血漿中藥物濃度。結(jié)果顯示，在長(zhǎng)