灰樹花多糖GF4A的結(jié)構(gòu)及化學(xué)修飾研究.pdf

1、灰樹花(Grifola frondosa)是一種名貴的食用真菌,具有抗癌、抗病毒以及提高人體免疫功能等多種藥理活性.該文以灰樹花發(fā)酵菌絲體為原料,通過各種提取分離和純化技術(shù),獲得了一種水不溶性多糖組分GF4A,采用各種化學(xué)分析以及現(xiàn)代儀器分析技術(shù)確定了它的一級結(jié)構(gòu),并對其進(jìn)行了化學(xué)修飾,進(jìn)而初步評價了—衍生物的活性.灰樹花發(fā)酵菌絲體采用乙醇、沸水、冷堿、熱堿等方法依次進(jìn)行提取,對得到的冷堿和熱堿提取水不溶性組分GFM2和GFM5分別進(jìn)行

2、了性質(zhì)考察.從糖含量較高的GFM2組分中進(jìn)一步純化得一純品多糖GF4A.經(jīng)凝膠柱層析檢測其純度較高,并測得其重均分子量約為109kD,糖含量為95.4﹪.在以上對GF4A的基本理化性質(zhì)進(jìn)行測定的基礎(chǔ)上,運(yùn)用化學(xué)分析方法(全水解、薄層層析、氣相色譜、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反應(yīng)、選擇性乙酰解、剛果紅結(jié)合反應(yīng)等)和波譜學(xué)方法(紅外光譜、紫外光譜、核磁共振波譜等)對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究,確定了GF4A的主鏈結(jié)構(gòu),糖基組成及分支情況,并根

3、據(jù)對各個實驗結(jié)果的分析提出了其可能的結(jié)構(gòu)單元.為改善GF4A的溶解性,選用了羧甲基化和硫酸酯化兩種方法對其進(jìn)行化學(xué)修飾,產(chǎn)物經(jīng)純化后制備得到兩個衍生化多糖樣品CGF4A和SGF4A.分別對其進(jìn)行性質(zhì)考察,測定其分子量分別為114kD、217kD.CGF4A的羧甲基度為1.55,SGF4A的硫酸基取代度為.97.UV和IR光譜掃描中見羧甲基和硫酸基的特征吸收,證明衍生方法是成功的.該文進(jìn)一步對SGF4A從事了小鼠移植性腫瘤免疫和抑瘤活性研

4、究,以腫瘤動物模型S180測定不同劑量下SGF4A的腫瘤抑制率,胸腺指數(shù),脾指數(shù).證明其活性優(yōu)于香菇多糖對照品,有較好的抗腫瘤活性和免疫增強(qiáng)活性.該文通過系統(tǒng)的對一種冷堿提取水不溶性灰樹花多糖GF4A的提取、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定、化學(xué)修飾及衍生物活性進(jìn)行研究,為進(jìn)一步從事灰樹花多糖的構(gòu)效關(guān)系研究提供了重要的結(jié)構(gòu)信息,同時也對其它真菌多糖的研究開發(fā)提供了借鑒.該研究也表明硫酸酯化灰樹花多糖SGF4A有較好的抗腫瘤和增強(qiáng)免疫力的活性,符合抗癌