谷氨酰胺改善內(nèi)毒素性休克血管低反應性及臟器損傷的可能機制.pdf

1、第一章谷氨酰胺對內(nèi)毒素性休克大鼠糖皮質(zhì)激素受體表達的作用 目的:探討內(nèi)毒素性休克時糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid receptor，GR)表達的變化及谷氨酰胺(Glutamine，Gln)對其的影響。 方法:18只健康雄性SD大鼠，隨機分成空白對照組(n=6)；內(nèi)毒素休克組(LPS[Sigma]10mg.kg<'-1>iV，n=6)；Gh預處理組(LPS注射前1h靜脈注射Gln 0.75 g.kg<'-1

2、>，n=6)?？瞻讓φ战M及LPS注射后6h處死三組大鼠，取各組大鼠心、肝、肺、腎、主動脈組織，用RT-PCR和Westem blot方法分別在基因和蛋白水平上觀察各臟器上GR的表達以及熱休克蛋白70的蛋白表達。 結(jié)果:對照組心、肝、肺、腎、主動脈僅有少量熱休克蛋白70的表達，但與對照組相比，LPS組各臟器熱休克蛋白70的表達顯著增高(P<0.05)。 Gln組熱休克蛋白70的表達較之LPS組有更進一步增加(p<0.05)。LP

3、S組GR的mRNA和蛋白表達較對照組明顯下降(p<0.05)；Gln預處理后上述臟器的糖皮質(zhì)激素受體基因和蛋白表達的減少均得以顯著恢復(p<0.05)。 結(jié)論:內(nèi)毒素性休克時糖皮質(zhì)激素受體在基因和蛋白水平上表達均減少。應用Gln可部分改善內(nèi)毒素性休克時糖皮質(zhì)激素受體下調(diào)，這種保護作用可能與其誘導熱休克蛋白70表達有關。 受體表達的作用目的觀察谷氨酰胺誘導熱休克蛋白對內(nèi)毒素性休克時α<,1>-腎上腺素受體(α<,1>-

4、ARs)蛋白表達和多個臟器組織病理學改變的影響。 方法:18只健康雄性SD大鼠，隨機分成空白對照組(n=6)；內(nèi)毒素休克組(LPS[Sigrna]10mg·kg<'-1>iv,n=6)；Gln預處理組(LPS注射前1h靜脈注射Gin 0.75 g·kg<'-1>，n=6)?？瞻讓φ战M及LPS注射后6h處死三組大鼠，取各組大鼠心、肝、肺、腎、主動脈，用Westernblot方法在蛋白水平上觀察心、肺、腎各臟器上α<,1A>-AR

5、、α<,1B>-AR和α<,1D>-AR的表達；檢測各組血漿Gln.和谷氨酸鹽含量，HE染色觀察心、肝、肺、腎、主動脈病理組織學變化。 結(jié)果:與對照組比較，LPS組大鼠心、腎、肺組織中的α<,1>-AR三種亞型的蛋白表達量均有極顯著下降(P<0.01)。應用Gln.后心臟組織(α<,1A>—AR、α<,1B>-AR和腎臟組織α<,1>-AR.三種亞型以及肺臟組織(α<,1A>—AR、α<,1B>-AR的蛋白表達都較LPS休克組

6、有明顯逆轉(zhuǎn)(P<0.01)；心臟的((α<,1D>—AR較LPS組表達增高(P<0.05)，肺臟的(α<,1D>—AR與LPS組相比無明顯差異。休克組的血漿谷氨酰胺濃度較之對照組明顯降低(P<0.01)，用Gln預處理后血漿Gln濃度降低不明顯，與對照組相比無顯著差異三組大鼠血漿谷氨酸鹽濃度無顯著差異。病理組織學示LPS組大鼠心、肝、肺、腎細胞都明顯腫脹，細胞間質(zhì)可見炎癥細胞浸潤；Gln預處理組大鼠各臟器炎癥細胞浸潤不明顯，細胞結(jié)構基本